教案-11DNA损伤修复和基因突变-长沙医学院.DOC

长 沙 医 学 院 教 案 课程名称 分子生物学 授课题目(章节或主题) 11．DNA损伤修复和基因突变 授课教师 陈珂珂 所属系（部） 基础系 所属教研室 生物技术 职称 助教 授课时间 2013年4月 8日第 6 周星期一 第3-5节 第11次课 授课时数 3学时 授课班级 药学专业（本科□ 专科 eq \o\ac(□,√) ） 2012 级 1 班 教学课型 理论课 eq \o\ac(□,√) 实验课□ 见习课□ 习题课□ 讨论课□ 其它□ 教材名称、作者、出版社及出版时间 《分子生物学》，主编郜金荣，武汉大学出版社 2012 教学目的要求： 1．掌握DNA突变的概念及突变类型及引起突变的因素；2．了解突变的意义； 3．掌握DNA损伤的修复机制； 重点与难点： 重点：DNA损伤修复；DNA突变的类型及引起突变的因素 难点：DNA损伤修复； 教学方法（请打√选择）： 讲授法 eq \o\ac(□,√) 讨论法□ 启发式□ 自学辅导法□ 练习法(习题或操作) 读书指导法□ ＰＢＬ（以问题为中心的教学法）□ 其他□ 教学手段（请打√选择）： 板书□ 实物□ 标本□ 挂图□ 模型□ 投影□ 幻灯 eq \o\ac(□,√) 录像□ CAI（计算机辅助教学）□ 教学过程设计和教学内容： 第十一章 DNA损伤修复及基因突变 受环境理化因素或生物学因素的影响，DNA序列会发生改变，包括碱基的变化、链的断裂、交联等，通过一定的修复机制对损伤DNA进行校正，保证遗传信息的稳定。 一．基因突变? 突变：是指DNA分子中碱基序列的改变，从而影响其表达产物的结构与功能。1. 突变的类型 点突变：碱基对的替换(转换和颠换)、插入、缺失； 同义突变：基因突变导致mRNA密码子第三位碱基改变，其意义不发生改变，翻译产物中的氨基酸残基顺序不变，但有时可引起翻译效率降低。 错义突变：基因突变导致mRNA密码子碱基被置换，其意义发生改变，翻译产物中的氨基酸残基顺序发生改变。 无义突变：基因突变导致mRNA密码子碱基被置换而改变成终止密码子，引起多肽链合成的终止。 移码突变：基因编码区域插入或缺失碱基，DNA分子三联体密码的阅读方式改变，使转录翻译出的氨基酸排列顺序发生改变。 2. 引起DNA损伤的因素： （1）?细胞内源性损伤因素： DNA复制错误； 自发损伤包括碱基互变异构、碱基脱氨（C→U、A→I）和碱基丢失等；氧化代谢副产物如活性氧物质（Reactive?oxygen?species，ROS）的攻击。 （2）?环境中的损伤因素：辐射（含紫外线、X射线）产生胸腺嘧啶二聚体； 化学致癌物（氧化脱氨，烷化剂或代谢活化物如苯并芘、黄曲霉素等产生 碱基加合物） 如：抑制碱基合成：5-氨基尿嘧啶 碱基类似物：5-BrU、2-AP 碱基修饰剂：亚硝酸、羟胺、烷化剂 嵌入试剂：吖啶橙AO、溴化乙锭EB 3. 基因突变的分子机制 二、修复方式：1．直接修复：又称光修复，由光修复酶修复因紫外照射引起的嘧啶二聚体，使其还原。 2．?切除修复：是最重要的修复方式，由UvrA、UvrB、UvrC、DNA-pol?I、dNTP、连接酶参与。首先UvrA、UvrB辨认损伤部位并与之结合，UvrC切除损伤的DNA，DNA-pol?I以dNTP为原料，填补切除空隙，最后由连接酶连接缺口，完成修复。 （1）碱基切除修复(Base?excision?repair、BER)该途径中最关键的是必须通过一种糖苷酶(glycosylase)先除去变异碱基(如 被氧化、烷基化或脱氨的碱基)，该糖苷酶催化连接损伤碱基与脱氧核糖之间的糖苷键水解，释放游离碱基并在DNA中产生一个去碱基位点，然后由去嘌呤／去嘧啶(AP)核酸内切酶、DNA聚合酶和DNA连接酶等利用相对的一条正常链为模板进行修补合成。 BER途径中的重要糖苷酶： ①尿嘧啶DNA糖苷酶(UDG)，从DNA中除去尿嘧啶碱基； ②3-甲基腺嘌吟DNA糖苷酶，可修复烷化剂产生的损伤； ③负责修复DNA氧化损伤的糖苷酶（如Fpg／MutM?DNA糖苷酶）BER是修复内源性DNA损伤(自发水解、烷基化和活性氧攻击)的主要途 径，因此对于降低自发突变的频率、防止肿瘤发生有重要作用。（2）核苷酸切除修复(Nucleotide?excision?repair，NER)由UvrA、UvrB、UvrC、DNA-pol?I、dNTP、连接酶参与。首先UvrA、 UvrB辨认损伤部位并与之结合，UvrC切除损伤的DNA片段，随着DNA链 被解开，包含损伤的单链片段释放出来，留下的缺口由DNA-pol?I填补，DNA 连接酶连接缺口，完成修复。 该途径包括20种以上蛋白，可以修复紫外