凡纳滨对虾围食膜蛋白基因全长DBG9的克隆及序列分析.PDF

第 卷第 期 水 产 学 报 年 月 文章编号 凡纳滨对虾围食膜蛋白基因全长的克隆及序列分析 陈秀荔 赵永贞 彭 敏 杨春玲 蒋伟明 李咏梅 曾地刚 马 宁 黎 铭 陈晓汉 吴铁军 广西水产研究所广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室广西南宁 摘要 为研究凡纳滨对虾围食膜蛋白在 感染虾体过程中的作用实验采用技 术构建了凡纳滨对虾肠道组织的全长 文库电子拼接获得了对虾围食膜蛋白基因全长 序列并进行了功能分析 全长 文库的库容达 重组率为 随机挑选 个克隆进行测序去除载体后得到插入长度 的有效序列 条根据同源片段长度不小于 同源性的原则对这些序列归并得到 条 从所测克隆中得到一个围食膜蛋白基因其 序列长度为 编码 由 个氨基酸组成的蛋白基因序列比对发现该序列与斑节对虾卵巢围食膜蛋白 和 围 食膜蛋白前体 短钩对虾围食膜蛋白 以及中国对虾围食膜蛋白编码序列的同源性较高 均达到 以上 通过半定量 对该基因在不同组织的表达分析结果表明该基因在 抗感染对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒 的对虾的心脏和胃中高表达在肝脏 肠和肌肉中表达较低在鳃中表达最弱在眼中不表达该基因在感染 病毒的对虾的 心脏表达明显减弱在肝脏眼肌肉和鳃中表达较低在肠道和胃中几乎不表达说明该基因 参与对虾抵御病原体侵入过程 关键词 凡纳滨对虾 围食膜蛋白 对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒 克隆 中图分类号 文献标志码 凡纳滨对虾养殖业是 围食膜是普遍存 我国海水养殖业的支柱产业对我国渔业经济稳定 在于节肢动物肠道内的一种重要结构是外源物 发展具有重要意义 然而病毒性疾病传播和蔓延 质通过消化道进入体内的第一道屏障 围食膜蛋 仍是影响凡纳滨对虾养殖业稳定发展的最大障碍 白和几丁质是围食膜的重要组成成分二者相互 解析凡纳滨对虾病毒性疫病的传播途径爆发规律 结合保证围食膜结构的完整性在动物消化吸收 和致病机理研发解决病毒性疾病蔓延的综合防控 营养物质的过程中能将外源病原体和毒素等有 措施一直是凡纳滨对虾养殖业亟待解决的难题也 害物隔绝在消化道之外 甲壳类动物的围食膜是 是当前凡纳滨对虾流行病学研究的热点 在凡纳 一类具有多重生理功能的非细胞的多层膜的管 滨对虾养殖过程中残食感染病毒对虾或尸体是引 状结构主要产生于中肠的主干部分它可能具有 起养殖对虾疾病大面积爆发的主因 消化道是病 抵御微生物细菌和病毒入侵的作用 围食膜 毒感染的主要窗口 因此发掘参与病毒感染肠道 主要由几丁质蛋白和糖组成 围食膜蛋白有 的关键基因阐释病毒在凡纳滨对虾肠道感染的分 众多几丁质结合功能域其与几丁质以共价或者 子机制对于指导凡纳滨对虾抗病育种 口服型抗 非共价键形式结合成致密的网状结构