克雷伯肺炎杆菌2丁二醇合成途径功能基因研究-山东农业大学.PDF

山东农业大学学报 自然科学版( ),2018,49(1):1-8 VOL.49NO.12018 Journal of ShandongAgriculturalUniversity (Natural ScienceEdition ) doi:10.3969/j.issn.1000-2324.2018.01.001 克雷伯肺炎杆菌2,3-丁二醇合成途径功能基因研究 1,2 3 1 2 2* 周吉东 郝晓蔚 王 敏 史吉平 郝 健, , , , 1. 天津科技大学生物工程学院,工业发酵微生物教育部重点实验室,天津市工业微生物重点实验室，天津 300457 2. 中国科学院上海高等研究院, 上海 201210 3. 河北科技大学, 河北 石家庄 050018 摘 要: 克雷伯肺炎杆菌2,3-丁二醇合成相关基因形成bud操纵子，其中budB 编码乙酰乳酸合成酶，budC编码丁二 醇脱氢酶。除了bud 操纵子中的基因外，在缬氨酸合成途径中ilvB 和ilvI 也编码乙酰乳酸合成酶，dhaD、gldA 和acyI 2,3- 三个脱氢酶都报道具有丁二醇脱氢酶活性。但是这些基因编码的酶蛋白对菌株合成 丁二醇的贡献并不清楚。本文 分别构建了budB、ilvB、ilvI 单突变株，和kp-ΔbudC-ΔdhaD-ΔgldA-Δacyl 四基因突变株，通过批次发酵实验对这些菌 株的生理特性进行了研究。结果显示ilvB 和ilvI 基因突变对于2,3-丁二醇合成无明显影响，而budB 突变株丧失2,3- 丁二醇合成能力，表明budB 编码的酶蛋白是 2,3-丁二醇合成途径中唯一的功能性乙酰乳酸合成酶。 kp-ΔbudC-ΔdhaD-ΔgldA-Δacyl 四基因缺失突变株合成2,3-丁二醇能力相较于kp-ΔbudC有所下降，但仍然能合成2,3- 丁二醇，表明dhaD，gldA 和acyI 编码的酶蛋白对于2,3-丁二醇合成贡献微弱，同时表明细胞中具有丁二醇脱氢酶功 能的醇脱氢酶种类较多。 关键词: 克雷伯肺炎杆菌;2,3-丁二醇; 乙酰乳酸合成酶; 丁二醇脱氢酶 中图法分类号:Q78 文献标识码:A 文章编号:1000-2324(2018)01-0001-08 Study on Functional Genes of 2,3-butanediol Synthesis in Klebsiella Pneumonia 1,2 3 1 2 2* ZHOU Ji-dong ,HAOXiao-wei ,WANGMin ,SHIJi-ping ,HAOJian 1. Key Laboratory of Industrial Fermentation Microbiology, Ministry of Education, Tianjin Key Laboratory of Industrial Microbiology, Collegeof Biotechnology, Tianjin University of Scienceand Technology, Tianjin300457, China 2.ShanghaiAdvancedResearchInstitute/ChineseAcademy of Science,Shanghai201210,China 3.Hebei University of Scienceand Technology,Shijiazhuang 050018, China Abstract: Genes related to 2,3-butanediol synthesis form a bud operon in Klebsiella pneumoniae. BudB enco