454高通量焦磷酸测序法鉴定膜生物反应器膜污染优势菌种.PDF

微生物学通报 Feb. 20, 2014, 41(2): 391−398 Microbiology China © 2014 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130178 生物实验室 454 高通量焦磷酸测序法鉴定膜生物反应器膜污染优势菌种 * 唐霁旭 王志伟 马金星 杨洋 吴志超 ( 200092) 摘 要：【目的】对诱发膜-生物反应器(Membrane bioreactors ，MBR)膜污染的优势菌种进行研 究。【方法】利用454 高通量焦磷酸测序法对MBR 污泥混合液样品与膜污染物样品中微生物 信息进行统计，并对两组样品的 Chao 丰度指数与 Shannon 生物多样性指数计算，对测序结果 进行系统发育学分析。【结果】从污泥混合液样品与膜污染物样品中获得9 353 与7 504 条优化 序列，发现膜污染物中微生物丰度与多样性均高于污泥混合样品。借助基因频谱对 OTU 分布 特点进行统计，表明源于污泥混合液中的微生物在膜表面定殖生长过程中发生了种群变化，在 膜面污染物样品中，β-变形菌纲丰度显著降低，α-变形菌纲、γ-变形菌纲与Phycisphaerae 在微 生物种群结构中比重增加。【结论】454 焦磷酸测序分析表明，黄色单胞菌(Xanthomonadaceae ) ， 嗜热厌氧杆菌(Thermoanaerobacter) ，Phycisphaera 以及 2 株尚未培养出的细菌 (Candidate_division_TM7 及Candidate_division_OD1)是诱发MBR 膜污染的优势菌种(微生物丰 度1%) 。诱发膜污染的细菌既包括了黏性高、表面疏水的种类(如γ-变形菌) ，从而引发细菌在 膜表面的定殖，也包括了代谢能力强的物种(如Candidate_division_OD1)可以确保种间递氢顺畅。 关键词：膜-生物反应器，膜污染，焦磷酸测序，微生物种群 Identifying predominant strains causing membrane biofouling by using 454 high-throughput pyrosequencing * TANG Ji-Xu WANG Zhi-Wei MA Jin-Xing YANG Yang WU Zhi-Chao (School of Environmental Science and Engineering, Tongji University, Shanghai 200092, China) Abstract: [Objective] We identified predominant strains causing membrane biofouling in membrane bioreactors (MBR). [Methods] 454 high-throughput pyrosequencing was applied to analyze the genes of bacteria originated from the sludge mixed liquor (S ) and membran