混菌同步糖化固态发酵丁醇的研究.PDFVIP

专 题 混菌同步糖化固态发酵丁醇的研究 混菌同步糖化固态发酵丁醇的研究 赵启红，陈洪章，王岚 中国科学院过程工程研究所生物质炼制工程北京市重点实验室，中国科学院大学，北京　100190 摘要：生物丁醇是一种极具发展潜力的清洁可再生能源燃料。目前工业丁醇生产仍存在能耗高、产量低以及污 染严重等问题。固态发酵体系中由于固体物含量较高容易造成传质传热困难、酶解效率低等难题，难以实现丁 醇混菌固态发酵。针对以上问题，从混合培养的优势以及固态发酵过程强化角度思考，以期为高效利用木质纤 维素原料制备燃料丁醇提供新思路。 关键词：丁醇固态发酵；菌种选育；混菌培养；木质纤维素；周期蠕动 DOI: 10.3969/j.issn.1674-0319.2018.03.007 丁醇发酵具有悠久的发展历史，Pasteur 最早报 株如大肠杆菌和酿酒酵母更为复杂，分子改造技术 道了利用微生物发酵法生产丁醇[1] ，Weizmann 博士 难度较大，且缺乏高效的遗传改造工具，对产丁醇 首次成功分离得到一株丙酮丁醇菌[2] ，其生产性能 菌进行氧气耐受性的遗传改造一直进展缓慢[3] ，目 有了很大提高，这为ABE （丙酮- 丁醇- 乙醇）发酵 前未有研究报道。由此可见，单独依靠改造产丁醇 的工业化奠定了基础。丁醇具有密度高、可任意比 菌以达到有氧环境下生产丁醇在实际操作中遇到了 例混合及运输方便等一系列特点使其成为继乙醇后 瓶颈。 的另一种性能优越的新型燃料。但是由于丁醇本身 目前，主要采用传统的诱变方法筛选产丁醇新 具有较大毒性，生物发酵过程中产丁醇菌的耐受极 菌株，如物理紫外线诱变、化学诱变、生物激素诱 限仅为2.0% （质量分数）丁醇浓度，直接制约了生 变等[4] 。中国科学院上海生命科学研究院植物生理 物丁醇的工业化生产。另外，生物丁醇发酵普遍是 生态研究所通过化学诱变的方法得到一株高产丁醇 在严格厌氧环境下进行，不仅操作过程繁琐而且设 的菌株Clostridium acetobutylicum EA 2018 ，发酵产 备投入成本较高，若能将丁醇发酵由传统的严格厌 溶剂比为丁醇 丙酮 乙醇=7 2 1，在百吨发酵罐 ∶ ∶ ∶ ∶ 氧发酵转变为有氧或微氧发酵，则有助于开拓生物 试验中得到的丁醇比例为71.9%，比原始菌株提高 丁醇发酵崭新的时代。本文针对丁醇固态发酵过程 10%左右[5] 。菌种驯化被认为是菌种选育最有效的 中所遇到的难题，从单一菌种发酵逐渐转变为混菌 一种方法，是将菌株暴露在人为设定的筛选环境中， 发酵的研究趋势，以及同步糖化发酵的过程强化这 通过压力选择，使得正突变的优良菌株不断被富集， 两个方面提出丁醇固态发酵的新思路。 经过多代选择，目标菌株的代谢能力会明显增强， 且具有稳定度高、不易退化等优点。因此，优良菌 1　单一菌种发酵生产丁醇 株在产生后如何被准确筛选成为菌种选育的一个关 键环节。 由于产丁醇菌的遗传背景比目前普通的模式菌 由于丙酮丁醇梭菌是细菌，无法形成明显的菌 落形态，同时代谢产物主要为易挥发的小分子物质， 第一作者：赵启红，在读博士，研究方向为生物发酵过程强化工程。 传统的菌落筛选技术（如菌落形态观察、透明圈法、 E-mail ：qhzhao@ 抑菌圈法）无法直接应用。笔者实验