豆豉溶栓酶工程菌的发酵条件及重组溶栓酶的分离纯化-食品与发酵工业.PDF

食品与发酵工业 )22( QF( )*[6*FYQY ?2F ?F(@8Y [?*8 豆豉溶栓酶工程菌的发酵条件及重组溶栓酶的分离纯化 肖 璐 张仁怀 张义正 （四川大学生命科学学院 四川省分子生物学及生物技术重点实验室，成都， ） !##!$ 摘 要 对豆豉溶栓酶工程菌株 %’()*+ 进行了摇瓶发酵条件的研究，确定了发酵的优化条件为：可溶性淀 粉 ，酪蛋白 ，大豆蛋白胨 ，酵母粉 ， ， ， ， , - , - # . + - # . + - / 012 # . ,+ - /0 12 # . #+ - 3435 # . #, - 6782 , $ , $ , $ # . #+ - ，0: . # 。通过硫酸铵分段盐析、离子交换和凝胶过滤，从 ; 工程菌株 %’()*+ 的发酵液中分离纯化 9 出, . + 7 重组豆豉溶栓酶，酶的比活为+= . : ? @A 7 。 关键词 重组豆豉溶栓酶（ ），基因工程菌，发酵条件，重组酶的纯化 B()* ［］ 自=: 年日本学者 8DE 等 首先报道了从日 组成型高效表达豆豉溶栓酶的基因工程菌株 本发酵食品纳豆中分离出一种具有强烈纤溶活性的 %’()*+ 为前期工作构建。 酶———纳豆激酶（ ， ）以来，从发酵食品 液体发酵培养 F4GGHIEJ4KL F / ! # 中分离溶栓酶的研究进展很快，已分离出多株溶栓酶 发酵基础培养基：碳源，氮源，酵母粉， / 012 , $ ［ ］ 产生菌, M $ 。豆豉与纳豆类似，是我国的传统大豆 # . ,+ - ，/0 12 # . #+ - ，3435 # . #, - ，6 782 , $ , $ 发酵食品和佐料，其制作方式比日本纳豆复杂。近年 # . #+ - ，0 : . , M : . + 。 9 ［ ］ 来研究人员相继发现豆豉中也存在溶栓酶+ M : ，并 ! $ 主要试剂 ［，］ 进行了一系列的研究 = 。豆豉溶栓酶与 F / 一样 纤维蛋白原、凝血酶、尿激酶购自中国药品生物 具有溶栓效果好，口服有效等特点，因此，不仅有望将