滇紫草愈伤组织培养的初步研究-中国科学院昆明植物研究所机构知识.PDF

维普资讯 云 南 植 韵 研 究 lSSN 0255-2700 Acta BotanicaYunna．ica CN 55-1039 滇紫草愈伤组织培养的初步研究 周立fij 郑光植 徐 纯 (中国科 学 院昆明植钎矸究所 ，昆明65D204) PRELIMINARY STUDY ON CALLUSCULTURE OF ONOSMA PANICULATUM ZHOU Li-Gang，ZHENG Guang—Zhi，XU ChNn (KunminoInstitoteofBotany，AcademioSiniea，Kur．m；ng650204) 关■词 滇紫革，愈伤组织，生长速率，紫草索 Key words Onosma d fc f“m，CallusIGrowth rate} Shikon[n ． 蹲紫草 (Onosmapaniculatum)属紫草科滇紫草属拄朝，其根部皮层富含的紫草 素 (a一萘醌系列衍生物)，可用作治疗外伤写诗疮的药物或高级染料以及化妆品：¨。滇 紫草为云南特有，由于人工栽培困难，加之不断采挖，致使选一资源受到严重的破坏， 产品供不应求。 日本Tabata等对紫草 (Lilhospermum eryfhrorhizon)的组织培养进 行丁一系列的研究 [1，2，”，但对滇紫草组织培养 以生产紫草素的研究至今未见报道。 基于选一现状，我们从1988年开始着手进行滇紫草组织培养的研究，以探讨应用组织培 养技术生产紫草索的可能性。 材 料 和 方 法 实验材料 用于诱导愈伤组织的实验材料是云南产的滇紫草。将滇紫草的种子在无 菌条件下发芽， 选取滇 紫草幼苗的根、 茎、 叶作外植体，用解剖刀 将它们切成1．O一 t 1．5cm的截断，接种到事先配好的诱导培养基上。 培养采件 愈伤组织诱导和培养采用LS： 、MS：-5：、B (6]、M一9-7；~NMG一5【3) 培养基。愈伤组织诱导的激素组合为2，4一D1ppm和KT1ppm。愈伤组织培养的激素组合 为IAA10 rnol／1和KT10一mol／1。三角瓶容量为50ml，内装培养基2oral，愈伤组织产量 和紫草素产量均以每瓶为单位计算。均置于25。C恒温条件下暗培 养，3O天继代培养一 次 。 99n年 1月收藕，19@O~F4月定稿 维普资讯 238 ；^ 竹 研 究 13拦 愈伤组织中紫草素的初步鉴定 取滇紫革愈伤组织培养物，冰冻干燥后打成细粉， 用石油醚提取，水洗石油醚，残渣溶于 甲醇，进行TLC层析。展开剂有两个：氯仿 ：石 油醚 ：醋酸乙酯=0．5：10：1为展开剂A}氯仿为展开剂B。层析时用标准品 (脱氧 紫草素、紫草素 目一日一二 甲