菌种保藏方法对裂殖壶菌生长及发酵性能的影响-生物加工过程.PDF

第 １２卷第６期 生　 物　 加　 工　 过　 程 Ｖｏｌ１２ Ｎｏ６ ２０１４年１１月 ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｐｒｏｃｅｓｓ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｎｏｖ２０１４ － ｄｏｉ：１０３９６９／ ｊｉｓｓｎ１６７２ ３６７８２０１４０６００３ 菌种保藏方法对裂殖壶菌生长及发酵性能的影响 胡学超，张　 丽，任路静，纪晓俊，黄　 和 （南京工业大学 生物与制药工程学院，南京 ２１１８００） 摘　 要：考察保护剂、保藏温度及预冷冻方法对Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｓｐＨＸ ３０８菌种存活率及发酵性能保持的影响。 结 － 果显示：在 ８０ ℃低温保藏６个月后，渗透性保护剂的细胞存活率均比非渗透性保护剂高了５％，其中用６０％（质量 － 分数）海藻糖的保护剂最终的株细胞存活率达到８００２％，明显优于其他保护剂。 采用液氮 １９６ ℃保藏菌种（两步 预冷冻法、６０％海藻糖保护剂），存储６个月后存活率高达９０７０％，生物量、油产量和二十二碳六烯酸（ＤＨＡ）产量 分别达到了６１６５、２６４１和 １１１０ ｇ／ Ｌ，为最优的保藏方法，为裂殖壶菌的实验室研究及工业化生产提供了一种长 期安全的保藏法。 关键词：裂殖壶菌；ＤＨＡ；菌种保藏；保护剂 － － － 中图分类号：Ｑ８１５　 　 　 　 文献标志码：Ａ　 　 　 　 文章编号：１６７２ ３６７８（２０１４）０６ ００１３ ０５ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｔｒａｉｎ ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｎ ｃｅｌｌ ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｏｆ Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｓｐ ＨＵ Ｘｕｅｃｈａｏ，ＺＨＡＮＧ Ｌｉ，ＲＥＮ Ｌｕｊｉｎｇ，ＪＩ Ｘｉａｏｊｕｎ，ＨＵＡＮＧ Ｈｅ （Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｎａｎｊｉｎｇ Ｔｅｃｈ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ ２１１８００，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｃｒｙｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｔｓ，ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐｒｅ⁃ｆｒｅｅｚｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｎ ｔｈｅ ｓｕｒｖｉｖａｌ ａｎｄ ｔｈｅ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｓｐＨＸ⁃３０８ ｗｅｒｅ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄＲｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｒｙｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｃｅｌｌ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｒａｔｅ ｗｈｅｎ ｕｓｉｎｇ ｐｅｒｍｅａｂｌｅ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ａｇｅｎｔ ｗａｓ５％ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ － ｔｈａｔ ｏｆ ｕｎｐｅｒｍｅａｂｌｅ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ａｇｅｎｔ ａｆｔｅｒ ｐｒｅｓｅｒｖｅｄ ６ ｍｏｎｔｈｓ ａｔ ８０ ℃． Ｈｉｇｈｅｓｔ ｃｅｌｌ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｒａｔｅ ｏｆ ８００２％ ｗａｓ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｗｈｅｎ ｕｓｉｎｇ ６０％ ｔｒｅｈａｌｏｓｅ． Ｉｎ ａｄｄｉｔｉｏｎ，ｆｕｒｔｈｅｒ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｏｆ ｃｅｌｌ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｒａｔｅ ｕｐ ｔｏ ９０７０％ ｗａｓ ｏｂｔａｉｎｅｄｗｈｅｎｕｓｉ