复方贞术调脂胶囊调控MEKKWnt偶联拮抗β-catenin泛素化改善大鼠.PDF

２０１８年２月 中国实验动物学报 Ｆｅｂｒｕａｒｙ２０１８ 第２６卷　 第１期 ＡＣＴＡ ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＩＵＭ ＡＮＩＭＡＬＩＳ ＳＣＩＥＮＴＩＡ ＳＩＮＩＣＡ Ｖｏｌ． ２６　 Ｎｏ． １ 研究报告 复方贞术调脂胶囊调控 ＭＥＫＫ２⁃Ｗｎｔ偶联拮抗 β⁃ｃａｔｅｎｉｎ泛素化改善大鼠糖皮质激素骨质疏松症 １，２，３ １，２ ４ １，２ ５ ∗ 洪郭驹 ，陈鹏 ，韩晓蕊 ，何伟 ，孙平 （１． 广州中医药大学岭南医学中心国家重点学科中医骨伤科学实验室，广州　 ５１０４０５；２． 广州中医药大学第一附 属医院关节骨科，广州　 ５１０４０５；３． 西澳大利亚大学生物医学科学院，珀斯６００９；４． 广州市第一人民医院放射科， 广州　 ５１０００６；５． 广东药科大学第一附属医院骨内科，广州　 ５１００００） 　 　 【摘要】　 目的　 探究复方贞术调脂胶囊（ＦＴＺ）干预下调控促分裂原活化蛋白激酶激酶激酶２（ｍｉｔｏｇｅｎ⁃ａｃｔｉｖａ⁃ ｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ ｋｉｎａｓｅ ｋｉｎａｓｅ ２，ＭＥＫＫ２）⁃Ｗｎｔ偶联拮抗 β⁃ｃａｔｅｎｉｎ泛素化，及对骨量变化、细胞成骨能力的影响。 方法　 ＳＰＦ级雄性大鼠随机均分为正常对照组、甲强龙组（模型组）、甲强龙＋生理盐水组（空白对照组）和甲强龙 ＋ＦＴＺ组（实验组）。 分别对股骨近端松质骨进行 Ｍｉｃｒｏ⁃ＣＴ检查、组织病理染色，测定Ｗｎｔ３ａ、ＭＥＫＫ２、β⁃ｃａｔｅｎｉｎ蛋 白表达；提取模型ＢＭＳＣｓ，经ＦＴＺ含药血清干预后，进行碱性磷酸酶和茜素红染色；测定成骨分化相关基因ＡＬＰ、 Ｒｕｎｘ２、ＯＣＮ表达；测定ＭＥＫＫ２、β⁃ｃａｔｅｎｉｎ蛋白表达；以及 β⁃ｃａｔｅｎｉｎ／ ＴＣＦ转录水平。 结果　 １）在Ｍｉｃｒｏ⁃ＣＴ 中，实验 组与模型组相比，前者ＢＶ／ ＴＶ、Ｔｂ．Ｔｈ、Ｔｂ／ Ｎ等值降低，Ｔｂ／ ｓｐ升高（Ｐ＜００５）。 ＲＯＩ三维重建可见实验组骨小梁骨 质改善，局部性修复；２）经苏木精⁃伊红染色中，实验组可见骨小梁密度较模型组高、骨小梁形态较好；３）实验组骨 组织中Ｗｎｔ３ａ、ＭＥＫＫ２、β⁃ｃａｔｅｎｉｎ表达较模型组增加（Ｐ＜００５）；４）ＧＩＯＰ大鼠模型提取ＢＭＳＣｓ并予ＢＭＰ２诱导，经 ＦＴＺ含药血清（实验组）干预后，碱性磷酸酶和茜素红染色结果提示实验组成骨反应增强（Ｐ ＜００５）；５）ＢＭＳＣｓ经 ＦＴＺ含药血清干预，可提高β⁃ｃａｔｅｎｉｎ／ ＴＣＦ转录活性（Ｐ＜００５）；促进 β⁃ｃａｔｅｎｉｎ、ＭＥＫＫ２蛋白表达（Ｐ＜００５）。 结论 ＦＴＺ通过调控ＭＥＫＫ２⁃Ｗｎｔ偶联拮抗 β⁃ｃａｔｅｎｉｎ泛素化防治ＧＩＯＰ，从而改善微观骨性结构。 【关键词】　 糖皮质激素性骨质疏松；复方贞术调脂胶囊；Ｍｉｃｒｏ⁃ＣＴ；ＢＭＳＣｓ；成骨 【中图分类号】 Ｑ９５⁃３３　 　 【文献标识码】 Ａ　 　 【文章编号】 １００５⁃４８４７（２０１８）０１⁃００３６⁃０９ Ｄｏｉ：１０３９６９／ ｊ．ｉｓｓｎ．１００５－４８４７２０１８０１００６ Ａｍｅｌｉｏｒａｔｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｔｈｅ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｆｕｆａｎｇ Ｚｈｅｎｚ