黄芩苷黄芪甲苷对铜绿假单胞菌生物膜的体外-上海中医药杂志社.PDFVIP

·６３· 上海中医药杂志２０１７年第５１卷第１１期ＳＨ．Ｊ．ＴＣＭＮｏｖ．，２０１７；Ｖｏｌ．５１Ｎｏ．１１ 实验研究 ＤＯＩ：１０．１６３０５／ｊ．１００７１３３４．２０１７．１１．０１８ 黄芩苷、黄芪甲苷对铜绿假单胞菌生物膜的 体外干预实验研究 李少滨，方　泓，成颜琦，弓少康，王培媛，吴银根 上海中医药大学附属龙华医院中医预防保健科（上海　２０００３２） 【摘要】　目的　研究黄芩苷、黄芪甲苷对铜绿假单孢菌生物膜形成的影响。方法　取铜绿假单胞菌ＰＡＯ１标准株，用黄芩苷、黄芪甲 苷对ＰＡＯ１生物膜的体外培养进行干预，以阿奇霉素作为实验体系阳性对照，０．９％ＮａＣｌ溶液为生理盐水阴性对照组。ＦＩＴＣＣｏｎＡ染 色，于共聚焦显微镜下观察不同培养条件下的生物膜的形态；同时，ＴＲＩｚｏｌ法提取总ＲＮＡ，ＲＴＰＣＲ检测ＬａｓＩｍＲＮＡ的表达情况，并对 ＰＡＯ１生物膜多糖蛋白复合物（ＧＸＬ）含量进行测定。结果　 与生理盐水组比较，在干预生物膜的ＴＥ（结构熵）与生物膜厚度、抑制 ① 多糖蛋白复合物（ＧＬＸ）产量以及抑制群感应系统（ＱＳ）Ｌａｓ１ｍＲＮＡ的表达方面，黄芩苷组、黄芩苷＋黄芪甲苷组、阿奇霉素组有明显 差异（Ｐ＜０．０１），黄芪甲苷组无明显差异（Ｐ＞０．０５）。 与阿奇霉素组比较，黄芩苷组在干预生物膜的结构熵（ＴＥ）与生物膜厚度以 ② 及抑制ＱＳ系统ＬａｓＩｍＲＮＡ的表达方面无明显差异（Ｐ＞０．０５），在抑制ＧＬＸ产量方面弱于阿奇霉素组（Ｐ＜０．０５）；黄芩苷＋黄芪甲苷 组在干预生物膜的结构熵（ＴＥ）与生物膜厚度以及抑制ＱＳ系统ＬａｓＩｍＲＮＡ的表达方面弱于阿奇霉素组（Ｐ＜０．０１），在抑制ＧＬＸ产量 方面弱于阿奇霉素组（Ｐ＜０．０５）；黄芪甲苷组在各方面均无明显差异（Ｐ＞０．０５）。结论　黄芩苷在干预铜绿假单胞菌生物膜生成、减 少多糖蛋白复合物产量及抑制ｍＲＮＡ的表达效果方面均有明显作用，而黄芪甲苷无明显作用。 【关键词】　铜绿假单胞菌；生物膜；黄芩苷；黄芪甲苷 ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｓｔｕｄｙｏｎｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎｏｆｂａｉｃａｌｉｎａｎｄａｓｔｒａｇａｌｏｓｉｄｅＩＶｏｎＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａ ｂｉｏｆｉｌｍｉｎｖｉｔｒｏ ＬＩＳｈａｏｂｉｎ，ＦＡＮＧＨｏｎｇ，ＣＨＥＮＧＹａｎｑｉ，ＧＯＮＧＳｈａｏｋａｎｇ，ＷＡＮＧＰｅｉｙｕａｎ，ＷＵＹｉｎｇｅｎ ＰｒｅｖｅｎｔｉｖｅＨｅａｌｔｈＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＬｏｎｇｈｕａＨｏｓｐｉｔａｌＡｆｆｉｌｉａｔｅｄｔｏＳｈａｎｇｈａｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ，２０００３２ Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　ＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｂａｉｃａｌｉｎａｎｄａｓｔｒａｇａｌｏｓｉｄｅＩＶｏｎｔｈｅｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａｂｉｏｆｉｌｍ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＴｈｅＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａＰＡＯ１ｓｔａｎｄａｒｄｓｔｒａｉｎｓｗｅｒｅｓｅｌｅｃｔｅｄ，ａｎｄｂａｉｃａｌｉｎａｎｄａｓｔｒａｇａｌｏｓｉｄｅＩＶｗｅｒｅｕｓｅｄｔｏｉｎｔｅｒｖｅｎｅｃｕｌｔｕｒｅｏｆＰＡＯ１ｂｉｏｆｉｌｍｉｎｖｉｔｒｏ，ｗｉｔｈａｚｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎａｓｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌａｎｄ０．９％ ＮａＣｌｓｏｌｕｔｉｏｎａｓｔｈｅｎｅｇａｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌ．Ｔｈｅｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｏｆｂｉｏｆｉｌｍｕｎｄｅｒｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｕｌｔｕｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄｂｙｃｏｎｆｏｃａｌｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ ａｆｔｅｒＦＩＴＣＣｏｎＡｓｔａｉｎｉｎｇ．Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ，ｔｈｅｔｏｔａｌＲＮＡｗａｓｅｘｔｒａｃｔｅｄｂｙＴＲＩｚｏｌａｎｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＬａｓＩｍＲＮＡｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＲＴＰＣＲ．Ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆ ｇｌｙｃｏｃａｌｌｙｘ（Ｇ