肠豳-食品与发酵工业.PDFVIP

肠豳 海洋假单胞杆菌褐藻胶裂解酶基因在大肠杆菌中的高效表达和活性检测。 张 瑾1，赵玉然1，梁君妮1，李兆杰1，杨文鸽1’2，薛长湖1 1(中国海洋大学食品科学与工程学院，山东青岛，266003)2(宁波大学生命学院，浙江宁波，315211) 摘要 利用PCR方法从假单胞杆菌基因组DNA扩增胞外褐藻胶裂解酶的全基因和缺损片段，构建表达质粒 强活性，108 的最佳浓度为O．6mmol／L，最佳诱导菌液密度oD。。。为o。5～o．6，最佳表达时间为3h，28℃低温诱导可以提高重 组蛋白的可溶性，可溶性蛋白相对表达量达到25％。 关键词 褐藻胶裂解酶，大肠杆菌，表达，酶活性，体系优化 褐藻胶是一种来源丰富，用途广泛的酸性海洋多 克隆表达未见报道。本研究利用pQE30系统在大肠 糖，由a—L一1，4古罗糖醛酸(G)及8一D一1，4甘露糖杆菌中高效表达并纯化了来自海洋假单胞菌 (Pse“do口z￡Promo咒a5 醛酸(M)随机组合