稳转STAT6－RNAi细胞株的构建及功能鉴定.PDF

中国生化药物杂志2014年第6期总第34卷 论著基础研究 稳转STAT6-RNAi细胞株的构建及功能鉴定 张玉山1，高国生2 (1．南阳市中心医院感染科，河南南阳473000；2．宁波市感染病医院肝病科，浙江宁波315000) [摘要] 目的 探讨RNAi慢病毒载体对HepG2稳转细胞株增殖、迁移的影响。方法感染实验分为4组：空白对照组(未经 毒感染HepG2细胞获得稳定表达STAT6一ORF和STAT6一RNAi的细胞株，利用PCR和Westernblot的方法检测稳定细胞株中STAT6的 表达丰度。CCK一8法检测稳转细胞株的细胞活性及Transwell实验检测稳转细胞迁移能力变化。结果通过TET的筛选，A功获得 亡)，细胞逐渐崩解、漂浮死亡，细胞活性显著降低(F=290．114，P0．001)，迁移能力显著下降。结论成功构建STAT6一RNAi和 STAT6一ORF稳定株，为后期建立动物模型，体内验证STAT6的生物学功能奠定了物质基础。 [关键词] 慢病毒包装；STAT6 RNAi干涉；感染；HepG2细胞 [中图分类号]R36．1[文献标识码]A[文章编号] Constructionof transfected in stably STATb-RNAiand HepG2 identificationofitsfunction ZHANGYu—shan1．GAO Guo—shen92 of Central (1．Department ofLiver Infection，NanyangHospital，Nanyang Infectious， 473000，China；2．Departnmn Disease 3 Ningbo hospital，Ningbo15000，China) To theeflectofRNAilentivirusvectoron cell [Abstract]Objectiveexplore Thevirusinfected stabilityHepG2proliteration．migration．Methods the cells were dividedintofour control with HepG2stably PLv．control groups：controlgroup(untreatment)，negativegroup(intected STAT6-RNAi STAT6．ORF group，andp