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多功能生长因子PTN和受体相互作用及跨膜信号传导 　　摘 要：PTN家族由两个成员组成，PTN(pleiotrophin)和MK(midkine)，PTN是由136个氨基酸组成的18kD分泌型多功能生长因子，MK与PTN有50％的氨基酸同源性，它们在正常的细胞的生长、分化和迁移过程中起着重要的作用，也在一些病理过程中，如肿瘤和老年性痴呆中扮演着重要角色，最近发现它们与酪氨酪蛋白激酶磷酸酶受体RPTPβ/ζ相互作用，调节底物β－Catenin(连环蛋白)的酪氨酸磷酸化水平，从而加深了对其生物学意义的了解，也为Ptn和Mk异常表达引起的疾病，如肿瘤和老年性痴呆的治疗提供了新的药物作用靶点。 　　关键词：多功能生长因子PTN； MK；信号传导 　　中图分类号：R994 　　文献标识码：A 　　文章编号：1007－7847(2007)01－0001－09 　　 　　1 PTN、MK的来源和蛋白质结构 　　 　　细胞外信号分子，例如生长因子，细胞因子，激素和细胞外基质蛋白在正常的生长和发育过程和一些病理过程中起着重要的作用，PTN(也叫HB－GAM)和MK是肝素结合生长因子，是这个家族中仅有的两个成员，它们不同于其它的肝素结合生长因子,PTN是一种18kD的肝素蛋白，最早是从牛的子宫纯化而得，对成纤维细胞具有弱的促有丝分裂作用[7]，而且同时发现它是一种从新生大鼠脑中提取能够促进神经细胞轴突生长的因子，现在人、牛、大鼠、小鼠和鸡的PTN、cDNA已经克隆和测序，编码一种168个氨基酸的蛋白质，包括32个氨基酸组成的信号肽，不同种属的Ptn基因高度保守，是目前所知的所有生长因子中最保守的一种基因，Mk是通过筛选胚胎癌细胞中用维甲酸诱导表达的基因，从鸡的基底细胞也纯化到同源蛋白，PTN和MK是富含半胱氨酸和碱性氨基酸的蛋白质，在脊椎动物，所有PTN和MK的10个半胱氨酸是保守的(图1)。 　　 　　这两种蛋白质的氨基酸的同源性约为50％，两种蛋白由两个结构域组成，C末端和N－末端，NMR结构分析显示，这两种蛋白质的三维结构很相似的(图2)。 　　 　　每个结构域由3个反向平行的β-片层组成，两个结构域由一个可变的结构区相连，虽然精确的结构和功能关系还有待阐明，有趣的是编码PTN的N-末端和C-末端cDNA至少可以转化NIH 3T3细胞，而MK只有C-末端有生物活性，例如，神经细胞轴突生长，纤维溶解和神经细胞的迁移功能，PTN和MK中的半胱氨酸残基通过二硫键相连显示这类蛋白质在不同pH、渗透压和有机溶解剂中都是很稳定的，PTN和MK从果蝇到人都存在，因此，推测其C－末端的结构是重要的，值得注意的是斑马鱼PTN的N，末端结构域(Mdk2)和人PTN的N－末端的部分结构域分别对神经发生和人乳腺癌细胞的生长具有优势负调控作用，PTN与肝素具有高亲和力，在细胞外它与肝素分离后被释放到细胞外基质中，通过CD和NMR分析显示肝素可以诱导PTN的构象改变，其与肝素的结合位点也位于β－，片层结构中，在人和鼠MK的C－末端发现两个肝素结合簇，簇I(人MK K79，R81和K102)和簇II(人MK K86 K87和R89),簇I识别硫酸肝素和硫酸软骨素蛋白聚糖，在神经细胞迁移时的相互作用，以及MK和酪氨酸蛋白磷酸酶RPTPβ/ζ的相互作用时起着重要作用。 　　 　　2 Ptn和Mk的基因表达 　　 　　Ptn基因在大鼠和小鼠发育的神经外胚层和中胚层的特殊细胞和特定阶段表达，出生后在脑组织中的表达很快达到高峰，体内的胶质细胞和神经细胞在表达的时间上有所不同，在成年，Ptn在睾丸子宫和一些胶质和神经细胞中持续表达，并且Ptn的表达还受到PDGF的上行调节，Ptn是首先从与PDGF同源的V-sis原癌基因转化的NIH 3T3细胞中发现的，随后从牛的子宫也纯化到，并发现对NIH 3T3和NRK鼠成纤维细胞具有促生长作用，在V-sis转化的细胞中Ptn的高表达与PDGF对Ptn基因的上行调节相一致，Pin基因5-末端的启动子有一对PDGF刺激起上行反应调节的血清反应元件，相反Mk基因的表达不受PDGF刺激的影响，但Mk的表达受到维甲酸的刺激而表达增加，人Mk基因的5-调控区含有一个维甲酸的反应元件和两个WT-1反应元件，维甲酸通过维甲酸反应元件诱导Mk基因的表达，WT-1反应元件中对WT-1起反应，导致Mk的表达降低。 　　在大鼠的脑缺血损伤过程中，Ptn基因表达水平增高，动物实验结果显示，在脑缺血损伤1-3d时内皮细胞，巨噬细胞和星状细胞的Ptn表达增加，缺血损伤7-14d天仍维持高水平的表达，此外，动物实验结果还显示，在创伤愈合过中，Ptn的表达增加，Ptn可能参与创伤愈合过程中的细胞增殖过程。 　　Ptn的基因表达也受到激素