沉默CX3CL1基因对骨髓间充质干细胞生长及其趋-第三军医大学学报.PDF

３４ 　　　　　　　　　　　　　　第三军医大学学报，２０１７，３９（１）　　 　　　　　　ｈｔｔｐ：／／ａａｍｍｔ．ｔｍｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ　 ＤＯＩ：１０．１６０１６／ｊ．１０００５４０４．２０１６０７１２９ 沉默ＣＸ３ＣＬ１基因对骨髓间充质干细胞生长及其趋化效应的影响 郝　磊，田　洪，牟长河，张玉波，周虎传，宋　川，刘　磊　　（４０００２０重庆，解放军第３２４医院脑血管病中心） 　　［摘要］　目的　构建大鼠趋化因子ＣＸ３Ｃ的配体 １（ｃｈｅｍｏｋｉｎｅＣＸ３Ｃｌｉｇａｎｄ１，ＣＸ３ＣＬ１）基因慢病 毒ＲＮＡ干扰（ＲＮＡｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ，ＲＮＡｉ）载体，观测其沉默 ＣＸ３ＣＬ１基因对骨髓间充质干细胞（ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗｄｅｒｉｖｅｄｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ，ｂＭＳＣｓ）生长及其趋化效应的影响。方法　首先分离、培养大鼠 骨髓ｂＭＳＣｓ，并予以流式细胞术检测鉴定。针对ＣＸ３ＣＬ１基因ｍＲＮＡ序列，筛选３个小干扰ＲＮＡ（ｓｍａｌｌ ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇＲＮＡ，ｓｉＲＮＡ）靶点并予以合成。把合成的ｓｉＲＮＡ导入ｂＭＳＣｓ，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测其对靶基因编 码蛋白的抑制效应，以此明确最佳 ｓｉＲＮＡ。设计与合成针对最佳 ｓｉＲＮＡ序列的短发夹 ＲＮＡ（ｓｈｏｒｔｈａｉｒ