一种新型PAK1抑制剂诱导结直肠癌DLD1细胞凋亡的机制研究.PDF

学 报 ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　２０１８，４９（２）：２２９－２３７ ２２９ 一种新型ＰＡＫ１抑制剂诱导结直肠癌 ＤＬＤ１ 细胞凋亡的机制研究 １，２ １，２ １，２ １，２ １，２ １，２ １，２ １，２ 王佳祺 ，陈　姣 ，孙晓艳 ，卢悟广 ，杨　洋 ，蔡雪婷 ，王小宁 ，曹　鹏 １ ２ （南京中医药大学附属中西医结合医院，南京２１００２８；江苏省中医药研究院细胞与分子生物学实验室，南京２１００２８） 摘　要　ＰＡＫ１蛋白激酶在肿瘤的发生发展中发挥着重要作用，筛选开发新的ＰＡＫ１抑制剂作为肿瘤治疗靶向药物具有重 要意义。传统的ＰＡＫ１抑制剂筛选方法存在成本高、效率低等缺陷，而计算机虚拟筛选可降低发现活性先导化合物的成本， ＴＭ 提高筛选效率。本实验采用计算机辅助药物虚拟筛选结合Ｚ′ｌｙｔｅ 高通量激酶筛选出１种ＰＡＫ１靶向候选化合物，体外酶 活性检测发现化合物１８（Ｋ７８８）具有良好的ＰＡＫ１抑制活性（抑制率为４２７％）。进一步通过 ＭＴＴ检测发现Ｋ７８８具有显 著的ＰＡＫ１阳性肿瘤杀伤活性，抑制活性优于阳性药ＩＰＡ３（ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆｐ２１ａｃｔｉｖａｔｅｄｋｉｎａｓｅｃｏｍｐｏｕｎｄ３）。采用流式细胞分 析、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测发现Ｋ７８８能通过抑制ＰＡＫ１的表达及其活化以激活ｃａｓｐａｓｅ凋亡通路，诱导结肠癌细胞 ＤＬＤ１的凋 亡。Ｋ７８８具有临床开发应用的潜力，可作为ＰＡＫ１靶向先导分子进行深入研究。 关键词　计算机辅助药物设计；ＰＡＫ１；酶活；增殖抑制；促凋亡 中图分类号　Ｒ９６５　　文献标志码　Ａ　　文章编号　１０００－５０４８（２０１８）０２－０２２９－０９ ｄｏｉ：１０．１１６６５／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－５０４８ 引用本文　王佳祺，陈姣，孙晓艳，等一种新型ＰＡＫ１抑制剂诱导结直肠癌ＤＬＤ１细胞凋亡的机制研究［Ｊ］．中国药科大学学报，２０１８，４９ （２）：２２９－２３７ Ｃｉｔｅｔｈｉｓａｒｔｉｃｌｅａｓ：ＷＡＮＧＪｉａｑｉ，ＣＨＥＮＪｉａｏ，ＳＵＮＸｉａｏｙａｎ，ｅｔａｌＡｍｅｃｈａｎｉｓｍｒｅｓｅａｒｃｈｏｆｎｏｖｅｌｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆＰＡＫ１ｉｎｄｕｃｉｎｇｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒ ＤＬＤ１ａｐｏｐｔｏｓｉｓ［Ｊ］．ＪＣｈｉｎａＰｈａｒｍＵｎｉｖ，２０１８，４９（２）：２２９－２３７ ＡｍｅｃｈａｎｉｓｍｒｅｓｅａｒｃｈｏｆｎｏｖｅｌｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆＰＡＫ１ｉｎｄｕｃｉｎｇｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒ ＤＬＤ１ａｐｏｐｔｏｓｉｓ １牞２ １牞２ １牞２ １牞２ １牞２ １牞２ ＷＡＮＧＪｉａｑｉ牞ＣＨＥＮＪｉａｏ 牞ＳＵＮＸｉａｏｙａｎ 牞ＬＵＷｕｇｕａｎｇ 牞ＹＡＮＧＹａｎｇ 牞ＣＡＩＸｕｅｔｉｎｇ 牞ＷＡＮＧＸｉａｏ １牞２ １牞２ ｎｉｎｇ 牞ＣＡＯＰｅｎｇ １ＮａｎｊｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ牞ＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＩｎｔｅｇｒａｔｅｄＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅａｎｄＷｅｓｔｅｒｎＭｅｄｉｃｉｎｅ牞Ｎａｎｊｉｎｇ２１００２８牷 ２ＪｉａｎｇｓｕＰｒｏｖｉｎｃｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ牞ＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＣｅｌｌｕｌａｒａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ牞Ｎａｎｊｉｎｇ２１００２８牞Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ　ＰＡＫ１ｐｌａｙｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｔｕｍｏｒｓＩｔｉｓｏｆｇｒｅａｔｓｉｇ