红细胞血型基因结构-HLA分型试剂盒.PDFVIP

维普资讯 中国输血杂志2007年2月第20鲞差 1期 C—hinJBloodTransfusion,F—eburary,2007,Vo1．20,No．1 · 81 · · 讲 座 · 红细胞血型基因结构 赵桐茂 (NationalInstituteofHealth，BethesdaMD20892，USA) 关键词：红细胞血型；基因，红细胞血型；分子，血型抗原；基因结构 中图分类号：R457。1 1 Q754 文献标识码 ：A 文章编号：1004—549X(2007)Ol一0081—07 目前被国际输血协会 (ISBT)命名的红细胞血型系统有 录产物，比如Duffy血型基因启动子TATA盒 内序列突变， 29个，包括将近 300个血型抗原，40多个遗传座位和 824个 结果不产生 Duffy血型抗原蛋 白。 等位基因(http：／／www．ncbi．nlm．nih．gov)。血型基因分型 启动子 外显子 内含子 g-R：~ 内含子 外显子 技术 日益完善，除了P血型系统外，其它血型基因均已被克 二 蒌}-_团 一t团 一t[ TATA框架 隆，积累了大量有关血型基因结构和多态性资料，为此 ISBT 转录、剪接、加工 已召开过 2次血型分子基因分型专题讨论会 [J]。在可预期 的未来，血型血清学分型是否可能被基因分型逐步取代，已 成为当前血型研究领域的热门话题[2]。为进一步促进中国 正常转录 外显子跳跃 在 DNA水平上的血型研究和应用，笔者参考了大量资料， w 匝 Ⅱ工二 w 区 [ 特别撰写了本文，重点介绍血型系统的基因结构、多态性及 携带血型抗原分子等方面的最新知识 ，对于不熟悉分子生物 哥译 哥泽◆ ooOOOOoo 学的读者，可作为红细胞基因分型的入 门指南 囿于篇幅， 正常蛋白质 截短的蛋白质 所引资料恕不一一列出，主要的可从文后文献中[3-s]查到。 图1 基因结构和蛋 白质合成示意图 1 基因 1．3 基因克隆和序列测定 碱基序列差异是血型多态性的 1．1 基因结构 基因由位于DNA上的若干编码多肽氨基 分子基础，因此基因测序是研究血型基因的必备工具。测定 酸序列的片段所组成，这些编码片段被称为外显子，被非编 碱基序列可以采用 2种检材：1)以RNA为检材 ，首先需要 码的内含子序列所隔离开 (图1)，通常所说的基因序列是指 通过反转录制备互补 DNA (cDNA)，再以eDNA为模板通 信使RNA (mRNA)序列。不同基因的外显子和 内含子数 过多聚酶链反应 (PCR)特异性扩增基因片段，然后可以直接 目不 同，如 Lewis和 Hh血型基因只有 1个外显子 ，Duffy血 使用该扩增产物测序，或是将扩增片段克隆到载体后再测 型基因有 2个外显子，而Chido~Rodgers血型基因含 41个外 序。这样得到的结果是待测基因的编码序列 ；2)以DNA为 显子，Knops血型基因含 47个外显子。不同基因的大小差 检材，可以直接通过PCR特异性扩