中国林蛙蛙卵抗癌活性蛋白的研究论文.docVIP

Ｙ’７９８＝ｉ７３ 辽宁师范大学＿ 一ｏ 硕士研究生学位论文 论文题目：中国林蛙蛙卵抗癌活性蛋白的 ，？－ 。 。｜． 研究 一ｉ ‘ 研究生： 王字 指导教师： 冯伯森尚德静 学科专业： 细胞生物学 年 级： ２００２级 辽宁师范大学研究生部 一 ， ２００５’年５月 论 文 精 选 中国林蛙蛙卵抗癌活性蛋白的研究 中国林蛙蛙卵抗癌活性蛋白的研究 研究生：王宇 指导教师：冯伯森尚德静 学科专业：细胞生物学中文摘要：中国林蛙（Ｒａｎａ ｔｅｍｐｏｒａｒｉａ ｃｈｅｎｓｉｎｅｎｓ豇）是我国东北地区长白山麓药、食两Ｊ｛｛｛｜的珍贵蛙种。中国林蛙蛙卵具有很高的营养价值，目前国内很多学者和企业已经对中国林蛙的卵油进行了研究开发和利用．但是．从中国林蛙蛙卵中提取抗癌活性蛋白的相关研究至今国内外还未见报道。 近年来国外学者研究发现，ＲＮＡ酶的类似街一蛙类卵蛋白已被证明具有明显的抗癌活性。分别来源于Ｒａｎａ．Ｐｉｐｉｅｎｓ（ＪＦ，美豹蛙）、Ｒａｎａ．ｃａｔｅｓｂｅｉａｎａ（牛蛙）和Ｒａｎａ．ｊａｐｏｎｉｃａ（日本水稻蛙）卵母细胞的蛙类卵蛋白ｏｎｃｏｎａｓｃ、ｃＳＢＬ和ｊＳＢＬ均表现出抗癌活性，后两种还表现出凝集活性。需特别指出的是，来源于Ｒａｎａ．Ｐｌｐｉｅｎｓ卵母细胞的蛙类卵蛋白ｏｎｃｏｎａｓｅ已经作为一种癌症化学治疗药物进入了人类临床试验的第三阶段。 本论文通过常规的生物化学方法，对我国特有两栖类——中国林蛙的蛙卵进行了营养成分分析后，从卵细胞中提取到具有抗癌作用的蛋白粗提物，经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ．１００枉层析实验．分离纯化得到中国林蛙蛙卵抗癌活性蛋白，并通过ＰＡＧＥ电泳、ＳＤＳ，ＰＡＧＥ电泳、等电聚焦等实验对其性质进行了研究。将Ｓ１８０胃肉瘤细胞接种至小鼠皮下，选取中国林蛙蛙卵抗癌括性蛋白不同浓度样品液。连续注射种瘤小鼠１５天后，计算抑瘤率；采用透射电镜观察缉胞形态学变化；用ＭＴＴ比色法、流式细胞检测等技术观察中国林蛙蛙卵抗癌活性蛋白对Ｋ５６２肿瘤细胞凋亡过程的诱导。 经研究发现，中国林蛙蛙卵中含有多种营养成分，其中蛋白质含量相对较高；中国林蛙蛙卵抗癌活性蚩白具有明显的抗癌作Ｈ！Ｉ，同时还具有ＲＮＡ酶活性。体内实验结果表明，中国林蛙蛙卵抗癌活性蛋白对小鼠Ｓ１８０胃肉瘤细胞有明显的抑制作＿ｌ＿ｌｊ。体外实验结果表明． 中国林蛙蛙卵抗癌活性蛋白能显著诱导Ｋ５６２肿瘤细胞发生凋亡，显微镜卜观察可见细胞膜破损、细胞变形或出现胞芽和缢痕，透明度和亮度均降低，细胞内山现有异物感的颗粒。细胞增殖作Ｊ；｛｛减低，活细胞数减少：电 论 文 精 选 孛撼林蛙蛙郛抗癫活性蛋臼豹研究镜Ｆ观察，细胞皱缩变小。施浆致密，核搠缩，染色质浓集、边聚化．形成不同形状大小的块状，胞质空泡化等。流式细胞分析显示，中国林蛙蛙卵抗癌活性蛋白作用螽，Ｋ５６２细胞Ｓ期ＤＮＡ岔壤远远低予Ｇ｛期ＤＮＡ禽－簦｜｝的二倍，说明中国拣蛙蛙舞抗癌活经骚盘对Ｋ５６２缎耱周期的痒翻赢在Ｇ，赣到Ｓ翔的关键点上。关键词中翻林蛙蛙卵，抗癌活性蛋白，分离纯化，细臌凋亡，ＲＮＡ酶活性 ２ 论 文 精 选 中国林蛙蛙卵抗瓣活性蛋亡｜的研究 Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｆｏｒｅｓｔ ｆｒｏｇ，ｉｔｓ Ｌａｔｉｎ ｎａｍｅ ｉｓ Ｒａｎａ ｔｅｒａｐｏｒａｒｉａ ｃｈｅｎｓｉｎｅｎｓｉｓ，ｔｈｅｙ ｏｎｌｙ ｇｒｏｗ ｉｎ Ｃｈａｎｇｂａｉ ｍｏｕｎｔａｉｎ ａｒｅａ，ｔｈｅ ｎｏｒｔｈｅａｓｔｅｒｎ ｏｆ Ｃｈｉｎａ．Ｔｈｅ ｅｇｇｓ ｏｆ Ｒａｎａ ｔｅｍｐｏｒａｒｉａ ｃｈｅｎｓｉｎｅｎｓｉｓ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ａｓ ａ ｄｒｕｇ ｂｅｃａｕｓｅ ｉｔ ｃｏｎｔａｉｎｓ ｍａｎｙ ｓｐｅｃｉａｌ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ｒｅｌａｔｅｄ ｍｏｄｕｌａｔｅ ｉｏｃｒｅｔｉｏｎ．Ｂｕｔ ｔｈｅｒｅ ｉｓ ｎｏ ｒｅｐｏｒｔｓ ａｂｏｕｔ ｔｈｅ ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ ｐｒｏｔｅｉｎ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｅｇｇｓ ｏｆ Ｒａｎａ ｔｅｍｐｏｒａｒｉａ ｃｈｅｎｓｉｎｅｎｓｉｓ ｉｎ ｔｈｅ ｗｏｒｌｄ ｒｅｃｅｎｔｌｙ． Ｉｎ Ａｍｅｒｉｃａ，ｓｏｍｅ ｒｅｓｅａｒｃｈｅｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｓｏｍｅ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｆｒｏｍ ｆｒｏｇ ｅｇｇｓ，ａｌｌ ａｎａｌｏｇ ｏｆ ｒｉｂｏｎｕｃｌｅａｓｅｓ，ｄｉｓｐｌａｙｅｄ ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｒｅｃｅｎｔｌｙ．Ｏｎｅ ｏｆｔｈｅｓｅ ｆｒｏｇ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｗａｓ ｃｕｒｒｅｎｔｌｙ ａｓ ａ ｃａｎｃｅｒ ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｉｎ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｔｒｉａｌｓ．Ｒｅｃｅｎｔ ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｂｏｕｔ ｔｈｅｍ ａｒｅ ｔｒｙｉｎｇ ｔｏ ｓｈｏｗ ｔｈｅ ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ