大鼠Smad7真核表达质粒构建及在肝星状细胞中抗纤维化特性地研究.pdfVIP

大鼠Smad7真核表达质粒构建及在肝星状细胞中抗纤维化特性地研究.pdf

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摘要 目的:肝纤维化(HF)是多种慢性肝病病情发展的共同病理基础和病理特征,是l临床肝病向肝硬化发 维化发生发展过程中最重要的促进冈子,是ECM沉积的关键介质,肝星状细胞(HSC)活化则是其中 细胞,旨在观察外源Smad7基冈可否有效转染肝星状细胞并初步研究其抗纤维化的效果,为进一步 探讨Smad7在TGF.B/Smad信号转导中的抗纤维化机制及用于肝纤维化治疗做准备。 获得Smad7 隆进行测序鉴定。脂质体介导转染HSC.T6,分为正常对照、空质粒组及转染组,运用免疫细胞化学 Smad7 mRNA的表达。 0.612,0.595,O.967,0.950)。 结迨: 1、人鼠Smad7/PcDNA3.1(+)真核细胞表达重组质粒构建成功; 2、Smad7及a—SMA在细胞浆中表达,a-SMA表达阳性提示HSC.T6被激活; 3、外源Smad7可有效转染HSC.T6,显著上调Smad7mRNA和蛋白表达水平; 在一定程度上可以使ECM的合成下降; 在一定程度上具有抗纤维化的生物学活性。 关键词:Smad7;转化生长冈子B;肝星状细胞;抗纤维化;基冈治疗 论文类型:A(基础研究) Abstract thecommon basisandfeaturesof kindsofchronic fibrosis(HF)is .Objectives:Hepatic pathology many liver characterized oftheextracellular factor disease,it’s bydeposition matrix(ECM).Transforminggrowth themost factorofthe of fibrosis.ECM is B(TGF-13)isimportantpromoting developmenthepatic deposition the mediumandtheactivationof stellate thecentrallink.Smad tosignal key hepatic cells(HSC)is belongs transduction TGF·13fromthemembraneintothecellnucleus.Smad7can TGF-B proteinmediating regulate transduction constructedandidentifiedrat signal negatively.Thisstudy transfecteditintoHSC-T6cell 2000,the isobserving expressingplasmid,and byLipofectminepurpose as whethertheextraneousSmad7cantransfectHSC··T6 aanti·-fibrosisfactor.It gene effectively provides transfectionofthis aloneorcombinedwith the foundationforfurther that experimental studying plasmid other tobl

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