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- 2018-10-15 发布于浙江
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第一章 遗传物质分子结构性质和功能.ppt
DNA变性 当DNA的稀盐溶液加热到80-100℃时,双螺旋结构即发生解体,两条链彼此分开,形成无规线团。 DNA变性后,它的一系列性质也随之发生变化,如紫外吸收(260 nm)值升高, 粘度降低等。 (2) 核酸的复性 变性DNA在适当的条件下,两条彼此分开的单链可以重新缔合成为双螺旋结构,这一过程称为复性。DNA复性后,一系列性质将得到恢复,但是生物活性一般只能得到部分的恢复。 DNA复性的程度、速率与复性过程的条件有关。 将热变性的DNA骤然冷却至低温时,DNA不可能复性。但是将变性的DNA缓慢冷却时,可以复性。分子量越大复性越难。浓度越大,复性越容易。此外,DNA的复性也与它本身的组成和结构有关。 DNA复性 (3) 核酸的杂交与应用 核酸的杂交是指序列互补单链的RNA和DNA,或异源DNA、异源RNA之间,根据碱基配对原则,借助氢键相连而形成双链杂交分子的过程。 核酸的杂交在分子生物学和遗传学的研究中具有重要意义。 核酸的杂交 核酸杂交的应用 核酸探针的定义:带有检测标记的能够与靶分子特异性的相互作用的一段核酸分子。 Southern印迹(DNA-DNA) Northern印迹(DNA-RNA) 原位杂交(探针-组织或细胞中的DNA或RNA) 第五节 病毒核酸 一、病毒的基本概念 二、病毒核酸的一般特征 一、病毒的基本概念 病毒就是一类由蛋白质外壳和DNA组成的专属性的细胞内寄生物,不能进行独立的能量及遗传物质代谢,只能依靠寄主繁殖的非细胞生物。 二、病毒核酸的一般特性 有环形的也有线形的 有正链(能起mRNA的作用)及负链之分 病毒核酸分子量差别很显著 病毒核酸利用率很高,同一段病毒核酸可以编码出几种不同的多肽链 病毒核酸的基因结构与其所寄生的真核生物相似,而不是与原核生物相似。是不连续的,具有内含子。 核糖核酸病毒(RNA virus) ,又称RNA病毒,其遗传物质为RNA,相较于DNA病毒,的RNA病毒都具有高变异性,因为它们缺乏具有修正错误的DNA聚合酶。 植物病毒,除少数例外(如花椰菜花叶病毒Caulif- lower mosaic virus),几乎都是RNA病毒。 双链核糖核酸病毒 The dsRNA Viruses 囊状噬菌体科(Cystoviridae) 呼肠孤病毒科(Reoviridae) 双核糖核酸病毒科(Birnaviridae) 整体病毒科(Totiviridae全病毒科) 金色病毒科(Chrysoviridae):金色病毒属(Chrysovirus) 分体病毒科(Partitiviridae) 低毒性病毒科(Hypoviridae):低毒性病毒属(Hypovirus) 正链核糖核酸病毒The positive-sense ssRNA Viruses 光滑病毒科(Leviviridae):光滑噬菌体科 二顺反子病毒科(Dicistroviridae) 微小核糖核酸病毒科(Picornaviridae):小核糖核酸病毒科 随伴病毒科(Sequiviridae伴生病毒科) 豇豆镶嵌病毒科(Comoviridae) 马铃薯Y病毒科(Potyviridae) 杯状病毒科(Caliciviridae):嵌杯病毒科 肝炎病毒科(Hepeviridae) 星状病毒科(Astroviridae) 野田病毒科(Nodaviridae) 四病毒科(Tetraviridae) 西红柿丛矮病毒科(Tombusviridae) 反链核糖核酸病毒The negative-sense ssRNA Viruses 单股反链病毒目(Mononegavirales) 副黏液病毒科(Paramyxoviridae):麻疹病毒 副黏液病毒亚科(Paramyxovirinae) 肺炎病毒亚科(Pneumovirinae)肺病毒亚科 炮弹病毒科(Rhabdoviridae)杖竿状病毒科 纤维病毒科(Filoviridae) 第六节 反义核酸 一、反义核酸概述 反义核酸是指能与特定mRNA精确互补、特异阻断其翻译的RNA或DNA分子(antisense nucleic acid)。 利用反义核酸特异地封闭某些基因表达,使之低表达或不表达,这种技术即为反义核酸技术。它包括反义RNA、反义DNA和核酶(ribozymes)三大技术。 反义核酶作为一种基因下向调节作用因子,在抑制一些有害基因的表达和失控基因的过度表达上发挥着重要作用。 二、反义核酸的作用原理 反义核酸目前有三种来源: 一是利用固相亚磷酰胺法人工合成的短小反义寡聚核苷酸antisense oligodeoxy nucleotides, AONs) ; 二是更具有实用价值的人工表达载体,包括
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