美国白蛾核型多角体病毒ORF72原核表达载体的构建、表达.PDF

林业科学研究　２０１８，３１（５）：５７ ６３ ＦｏｒｅｓｔＲｅｓｅａｒｃｈ 　　ＤＯＩ：１０．１３２７５／ｊ．ｃｎｋｉ．ｌｙｋｘｙｊ．２０１８．０５．００８ 美国白蛾核型多角体病毒ＯＲＦ７２原核表达 载体的构建、表达及纯化 １ ２ ２ ２ ２ １ 李　娜 ，李恩杰 ，王青华 ，王玉珠 ，张永安 ，段立清 （１．内蒙古农业大学 林学院，内蒙古 呼和浩特　０１００１９；２．中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所，北京　１０００９１） 摘要：［目的］根据Ｉｋｄｅａ对ＨｙｃｕＮＰＶ全基因组序列的分析，筛选出功能还未被研究的、保守性高的ＯＲＦ７２基因。 ［方法］将ＯＲＦ７２基因构建到原核表达载体ｐＧＥＸ４Ｔ１上，对其进行诱导表达，优化表达的条件，并通过 ＧＳＴ亲和 层析色谱柱纯化融合蛋白。［结果］重组质粒ｐＧＥＸ４Ｔ１ＯＲＦ７２的酶切检测以及测序结果均正确，证明重组质粒载 体构建成功。通过ＳＤＳＰＡＧＥ凝胶电泳显示，ＯＲＦ７２蛋白能够与ｐＧＥＸ４Ｔ１载体上的ＧＳＴ标