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地黄基因RghBNG转化地黄过表达的研究 　　摘要：用RT-PCR技术从地黄[Rehmannia glutinosa （Gaertn.） Libosch.]幼叶中克隆地黄基因RghBNG，使用Pst I和Hind Ш分别酶切地黄基因RghBNG和植物表达载体pCAMBIA302-GFP，经过重组，构建其过表达载体，转化农杆菌菌株GV3101，获得其工程菌；采用农杆菌介导法，将该基因转入地黄幼叶细胞，再生转化地黄植株。经过潮霉素抗性筛选、PCR和qRT-PCR检测，获得过表达基因RghBNG地黄植株。这些结果为进一步阐明地黄基因RghBNG功能和地黄遗传改良奠定了基础。 　　关键词：地黄[Rehmannia glutinosa （Gaertn.） Libosch.]；RghBNG；过表达载体；qRT-PCR；农杆菌介导 　　中图分类号：R282；Q786 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2017）17-3342-03 　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.17.039 　　The Transformation of Rehmannia glutinosa RghBNG Gene into Rehmannia 　　glutinosa （Gaertn.） Libosch. for Overexpression 　　ZHOU Yan-qing， YANG Ke， ZHANG Yu， ZHANG Dan-dan， LI Meng-chen， YU Meng 　　（College of Life Science， Henan Normal University， Xinxiang 453007， Henan， China） 　　Abstract： The RghBNG gene was cloned from Rehmannia glutinosa（Gaertn.） Libosch. leaves by RT-PCR. Pst I and Hind III as upstream and downstream enzyme，respectively，were used to digest RghBNG and the plant expression vector pCAMBIA-l302 in order to construct plant overexpression vector pCAMBIAl302-RghBNG-GFP. The overexpression vector was introduced into Agrobacterium tumefaciens strain GV3101 so that its engineered bacteria were obtained. RghBNG was transformed into Rehmannia glutinosa（Gaertn.） Libosch. leaf cells using Agrobacterium-mediated transformation，and hygromycin-resistant transgenic Rehmannia glutinosa（Gaertn.） Libosch. plantlets were obtained via tissue culture，which were confirmed by PCR and qRT-PCR analyses. These results will build up the foundation for further verification of RghBNG functions and its application in Rehmannia glutinosa （Gaertn.） Libosch. genetic improvement. 　　Key words： Rehmannia glutinosa（Gaertn.） Libosch.；RghBNG；overexpression vector；RT-qPCR；Agrobacterium-mediated transformation 　　地?S[Rehmannia glutinosa （Gaertn.） Libosch.] 为玄参科（ScrophuLariaceae）地黄属植物，主要栽培品种有怀地黄1号（金壮元）、怀地黄2号（北京1号）、怀地黄3号（温85-5）和金九等，主要分布在中国的河南、山东、陕西和山西等地，但河南焦作的“怀庆府”的怀地黄最为著名[1]。地黄多以块根入药，以炮制方法不同，可分为鲜地黄、生地黄和熟地黄3种形式。地黄主要化学成分为