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细菌纤维素发酵条件的优化及结构的初步研究
细菌纤维素发酵条件的优化及结构的初步研究
周伶俐1 孙东平1 张继东1 朱明阳1 吴清杭1 杨树林1 许春元2
2(连云港登泰实业有限公司,连云港,222000)
1(南京理工大学化工学院生物工程系,南京,210094)
NUs,r4.2合成细菌纤维素的发酵条件为:葡萄糖
摘 要 通过单因素及正交实验探索出A研咖c舸圳i,z“m
1.5%、蔗糖1.0%、蛋白胨1.5%、醋酸0.08%、Na2HP040.27%、MgS040.025%,接种量8%,pH5.5,28℃静置
培养7d,纤维素产量为3.348g凡培养基(干重)。接着利用活性炭柱分离和气一质联用色谱(oGMS)鉴定了发
酵产物的单体成分为葡萄糖;采用固体CP愈IASl3CNMR、透射电镜(TEM)、x一射线衍射表征了发酵产物的结
构,得知该产物具有典型的网状结构,纤维束尺寸为纳米级且结晶度很高。
关键词 细菌纤维素,发酵,表征,结构
纤维素是地球上最丰富的天然聚合体,广泛存在 CP小nSl3C
于树木、棉花等植物中,少量存在于若干细菌和个别 表征了发酵产物的结构,证明了发酵产物是细菌纤维
低级动物中…。细菌纤维素(BC)是由某些微生物合素,并形成纳米级纤维丝,结晶度很高,为今后进行生
成得到的超微纯纤维素,由D-葡萄糖以B一1,4糖苷物纳米材料功能性方面的研究提供了一定的理论基
键连接而成的链状多糖高分子,具有(C6H1005)。的组础。
成【2J。与自然界中存在的植物纤维素相比,具有纯
1材料和方法
度高、结晶度高、重合度高、吸水性强、抗张强度好、生
物适应性强等独特的性质。目前国外研究主要有: 1.1材料
(1)改变生物合成环境下的物理、化学或生化条件来 菌种:A∞£o沈c据r∞记i咒甜m
改变纤维素装配的高度序列结构及其产量,即在BC 筛选并保藏。
发酵的培养基中添加一些物质来提高产量或者改变 1.2培养条件和培养方式
BC的结构和性质,如水溶性的多糖(琼脂旧J、ac— 固体培养基:葡萄糖3.0%、蛋白胨1.0%、柠檬
etan【4J等)阻碍大团块的纤维素的生成,增加溶氧从
而提高产量,添加壳聚糖结合2种多糖的性质应用于 6.0。
2.0%,pH
医学上[5|,或者添加抗生素(萘啶酸和氯霉素)和化 种子培养液:葡萄糖2.0%、蛋白胨1.0%、柠檬
学试剂培养改变菌株细胞长度来改变细胞生产的微 0.01%、Mg—
纤维(microfibril)宽度,进而影响杨氏模量帕。等等; 6.0。
S040.025%,pH
(2)BC的改性,如将干BC产品浸泡于酚醛树脂溶液发酵培养液:葡萄糖1.5%、蔗糖1.0%、蛋白胨
中后作热压处理可提高杨氏模量等方法来进一步拓
宽其应用范围r列;(3)利用多种检测手段分析BC的 5.5。
0.1%、MgS040.025%,pH
结构和性质,如用二维NMR分析丝光纤维素Ⅱ中”
种子培养液接种后摇床培养6~8h(150r/min,
C和1H的分布【8J等;(4)发明多种发酵罐旧叫1|,如今
为扩大BC的工业化生产和开发应用领域,需筛选性 培养7d或摇床(100r/min)培养5d,生产纤维素。
能稳定的菌种、优化发酵条件以提高产量并利用聚合 1.3产物的提纯
物表征的分析方法来进一步研究BC的结构、性能和 NuST
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