干扰素γ干扰素α2b二者联合的应用诱导MCF7乳腺癌细胞凋亡及机制.docVIP

干扰素γ干扰素α2b二者联合的应用诱导MCF7乳腺癌细胞凋亡及机制 　　【摘要】目的:研究干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)、干扰素-α2b(Interferon-α2b,IFN-α2b)二者联合应用对MCF-7乳腺癌细胞的诱导凋亡作用,并探讨其诱导凋亡作用的机制。方法:通过流式细胞仪(FCM)检测处理后细胞凋亡情况及Fas/FasL蛋白表达情况。结果:MCF-7乳腺癌细胞处理后凋亡细胞百分率增加,并且随着处理时间的延长,凋亡细胞百分率有增加趋势,差异显著,有统计学意义(p0.05)。结论:干扰素-γ、干扰素-α2b二者联合应用可诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡,作用机制可能与通过上调FasL蛋白的表达,加强Fas/FasL之间的交联及使Fas/FasL通路敏感性增加有关。 　　 　　关键词:IFN-α2b;IFN-γ;MCF-7乳腺癌细胞;作用机制;细胞凋亡;流式细胞技术;Fas/FasL 　　中图分类号:R71文献标识码:A 文章编号:1671-4954(2010)03-0162-05 　　doi:10.3969/j.issn.1671-4954.2010.03.001 　　 　　【Abstract】:Purpose:To investigate apoptosis of the MCF-7 breast cancer cells treated by interferon-γ combinated with interferon-α2b and its mechanism.Methods:Detected the apoptosis and Fas/FasL protein of the MCF-7 breast cancer cells after treated by interferon-γ combinated with interferon-α2b through flow cytometry (FCM). Results:The percentage of apoptotic cells increased after treated,and as the extened of time,the percentage of apoptotic cells increased,the difference was considered significant(p0.05).Conclusion:Interferon can induced apoptosis in MCF-7 breast cancer cells.Mechanism of the apoptosis may be related by upregulated the expression of FasL protein and increased the sensitives of the Fas/FasL in the MCF-7 breast cancer cells. 　　Keywords:IFN-α2b;IFN-γ;MCF-7;mechanism;apoptosis;flow cytometry; Fas/FasL 　　 　　乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,国内外乳腺癌发病率呈上升趋势,全世界每年约有120万妇女发生乳腺癌[1],占女性肿瘤发病率的第一位,乳腺癌的发生发展是一个多基因多阶段的变化过程,是由基因和环境因素联合作用而引起的疾病。近年来,国内外文献报道,肿瘤的发生不仅与细胞的异常增生和分化有关,且凋亡机制参与多种肿瘤的病理过程,细胞凋亡与肿瘤发生发展及消退密切相关。现代肿瘤学认为肿瘤细胞凋亡机制的失活是恶性肿瘤发生发展的普遍特性。诱导细胞凋亡成为治疗肿瘤的新途径。干扰素(Interferon,IFN)是一类重要的抗肿瘤、抗病毒和免疫调节作用的细胞因子,可通过阻滞细胞周期、诱导抑癌基因的表达,增强肿瘤细胞对凋亡信号敏感性而发挥抗肿瘤活性。有关干扰素诱导肿瘤细胞凋亡的研究屡见报道,但有关Ⅰ型和Ⅱ型干扰素联合作用诱导乳腺癌细胞凋亡的研究甚少。 　　本实验选用干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)、干扰素-α2b(Interferon-α2b,IFN-α2b)二者联合应用诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡,并探讨其诱导凋亡作用的机制,为其进一步临床应用提供理论依据。 　　 　　1.材料与方法 　　1.1药品与试剂 　　基因重组人IFN?γ:上海克隆生物高科技术有限公司,基因重组人IFN-α2b:北京远策药业有限责任公司,RPMI Medium 1640 培养基:GIBCOBRL 公司,胎牛血清:北京元亨圣马生物技术研究所, Fas/FasL单克隆鼠抗人:美国Santa cruz公司