辣根过氧化物酶HorseradishPeroxidaseHRP.PPT

四、酶标抗体工作浓度确定 取rhPI（1000 ng/ml）加入最适工作浓度15F3包被的酶标板中； 然后加入1:200、1:300、1:400、1:500、1:600、1:700和1:800系列稀释的酶标抗体HRP-13A4进行测定； 以P值为1.0时酶标抗体稀释度作为HRP-13A4最适工作浓度。 阳性吸光值达1.0以上，阴性对照吸光值低于0.1时，酶标抗体最大稀释度为1∶500。因此，酶标抗体HRP-13A4的工作浓度为1∶500。 Fig 2-2. Electing the optimal dilute strength of HRP-labeled antibody 13A4 for the capture ELISA. The experiment was carried out in triplicate and the curve represents the average values obtained. 五、最适抗原包被浓度的优化 将包被抗原（RC-BSA）稀释成1.0ug/ml，2.5 ug/ml，5.0ug/ml，7.5ug/ml，10.0ug/ml等五个浓度，包被微孔板，100ul/孔； 竞争抗原浓度为2.0ug/ml； 酶标抗体稀释度为1:500，经孵育、显色、终止后用自动酶标仪分析。 显色的强度在一定范围内与包被的抗原量成正比，但随着包被抗原浓度