常见植物的脱毒与快速繁殖技术教学教案.pptVIP

第9章 常见植物的脱毒与快速繁殖技术 ;第一节 蔬菜的脱毒与快繁 ;一、马铃薯的组织培养;微型薯; 马铃薯是一种全球性的重要经济作物。适应性广，营养价值高，耐贮藏适运输，既是一种重要的粮食作物也是一种调节市场供应的重要蔬菜。马铃薯原产于拉丁美洲，当被发现可以食用后，很快传到世界各地，成为栽培很广的一种作物。; 危害有17种之多，如X病毒、S病毒、Y病毒、M病毒、A病毒、花叶病毒、纺锤形块茎病毒等。 马铃薯病毒可使块茎产量减少50%~80%。 ;1、形态特性 根 根系由出生根和匍匐根组成。 茎 分地上部分和地下部分。 叶 全缘，心脏形。 花 为聚伞花序。 果实 浆果。;马铃薯性喜冷气候，不耐高温和霜冻。 发芽适温为12~18℃。 地上茎叶生长温度为17~21℃。 块茎形成要求昼温14~24℃，夜温12~14℃。 结薯期要求12h左右的短日照和疏松、湿润、肥沃以及通气良好的土壤条件。土壤板结，薯块表面粗糙和薯形不整。;通过微茎尖组织培养技术能从马铃薯体内脱除PLRV、PVY、PVA、PAF、PVG、PVM、PSW等病毒。;全国现有马铃薯播种面积300多万公顷，每年需合格种薯45亿公斤，脱毒原种4亿公斤，脱毒小薯或微型薯45亿粒。; 微茎尖组织培养-----诱导出苗-----联免疫吸附试验法或指示植物方法鉴定-----脱毒试管基础苗。 固体、液体培养基相结合-----扩繁基础苗----在防虫网室栽植或封闭温室扦插-----原原种（或称脱毒小薯）。原原种----原种1代----原种2代----良种1代-----良种2代。;（1）茎尖消毒; 把消毒芽在解剖镜下逐层剥去幼叶，露出圆滑的生长点，留1-2个叶原基，0.2—0.3毫米，随即接种于MS液体培养基上，每升加0.1mgNAA 、 0.2mgGA3、0.5BA，2%蔗糖，p H值5.8。;温度：21~25℃ 光照度：2000-3000 lx 光照时间：12h/d 2-3周长愈伤，4-5周长绿点，3--6月长成2-3厘米小芽，越慢越好，出芽很快的扔掉。 ; 培养成功的马铃薯脱毒苗，经ELISA（试剂盒）鉴定后（试管苗应每3月检测一次，每年4次）采用固体、液体培养基相结合方法扩繁。 取试管苗单节切段扦插在（或平放）固体培养基上，每瓶可插20个左右茎段，经20d左右发育成5~10cm高小植株，继续进行切段繁殖，此法速度快，每月可繁殖5~8倍，试管苗多节接种在液体培养基上，进行浅层静止液体培养。;MS+NAA0.2-0.5+D-泛酸钙10，3%蔗糖； 20-25℃，3000-4000LX，14-16hr光照； 每3周继代一次，单芽茎段约1厘米； 原则试管苗用2年—3年。 ;马铃薯试管苗;炼苗室温度：白天23~27℃，夜间不低于14℃。 炼苗具体方法：移植前7d左右，将长有3~5片叶、高2~3cm的试管苗，在不开瓶口的状态下，从培养室移至温室排好。为防止强光、高温灼伤试管苗，在温室顶上加盖一层黑色遮阳网。 ; 1、指示植物鉴定 在马铃薯的病毒鉴定中，汁液鉴定是最常用的方法，Ｘ病毒、Ｓ病毒和纺锤块状病毒很容易通过汁液来接种。 2、鉴定寄主的准备 马铃薯常用的鉴定寄主植物有苋科的千日红，茄科的洋酸浆、毛曼佗罗等。寄主植物应在无虫网室中培养。; 叶片洗净后。在消毒的研钵中研成糊状，用纱布滤出汁液，再用蒸馏水稀释１０倍作为接种物(混入６００目的金刚砂)。 用左手心紧靠在鉴定寄主植物的背面，以右手指蘸取接种液，均匀的在叶背面擦过，以不造成叶片产生伤痕为度，最后把叶面上多余的接种物用清水洗净，放置在１５～２４的防虫室中，一般５－１０天可发病。 ;（１） 直接块茎繁殖 （２） 扦插繁殖 （３） 组织培养切段繁殖 A：继代培养 B：低温保存;二、番茄的组织培养;（二）、番茄的组织培养;（三）、番茄的胚培养;第二节 果树的脱毒与快繁 ;一、苹果的脱毒与快繁;（二）、脱毒技术;（三）、苹果茎尖脱毒快繁技术 ;（四）苹果花粉培养;（五）胚培养;二、葡萄的脱毒与快繁 ;（二）、葡萄的组织培养 ;（三）、葡萄无病毒苗的培养? ;（三）、葡萄无病毒苗的培养? ;2、组织培养脱毒技术 （1）、茎尖接种后变绿、增大期的培养：在25℃，相对湿度80%，16h的长日照条件下水培生成的嫩茎取0.2～0.3mm 茎尖接种于 1/2MS，添加NAA0.1，BA1.0，Kt0.5，腺嘌呤4.0，蔗糖30g/L，琼脂6.0，pH5.8培养基上。 （2） 从畸形叶和茎叶伸长期：采用1/2MS，添加IAA0.2，BA0.1，KT0.5，腺嘌呤4.0，蔗糖30