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第40卷摇 第4期 北 京 林 业 大 学 学 报 Vol.40,No.4
2018年4月 JOURNAL OF BEIJING FORESTRY UNIVERSITY Apr. ,2018
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DOI:10.13332/ j.1000 1522
基于Cas9/ gRNA创制毛果杨COBRA3基因突变体
崔永耀摇 程玉祥
(东北林业大学林学院,林木遗传育种国家重点实验室)
摘要:揖目的铱COBRA对植物生长发育具有重要作用,已有的研究表明,植物COBRA 基因与其次生生长有关。 为探
究树木COBRA基因信息及部分基因功能,我们对毛果杨PtrCOBRA基因家族展开识别和分析性研究。 揖方法铱分
析PtrCOBRA家族成员关系时运用系统进化树,确定毛果杨PtrCOBRA家族基因的各组织转录表达时采用半定量
RT鄄PCR,创制PtrCOBRA3基因突变体时使用Cas9/ gRNA基因编辑策略,毛果杨遗传转化采用农杆菌介导组培幼苗
茎段浸染法。 揖结果铱我们识别毛果杨基因组上存在14个PtrCOBRA基因成员,进化树显示PtrCOBRA家族分成两
个分支。 半定量RT鄄PCR表明,PtrCOBRA3和PtrCOBRA11在毛果杨木质部高丰度、特异地转录表达,在木质化茎节
中其转录水平也较高。 基于 Cas9/ gRNA 技术我们敲除了毛果杨 PtrCOBRA3,获得4 株ptrcobra3 敲除突变体。
ptrcobra3 突变体植株表型:植株矮小,叶片细长且卷曲,茎干略有弯曲。 揖结论铱PtrCOBRA3 和 PtrCOBRA11是
PtrCOBRA家族中与毛果杨次生生长相关的主要成员;基因敲除遗传证据显示PtrCOBRA3基因参与毛果杨茎干次
生生长,PtrCOBRA11与它存在功能的冗余。
关键词:毛果杨;PtrCOBRA3;基因突变体;Cas9/ gRNA
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中图分类号:S718郾46;S792郾119摇 摇 文献标志码:A摇 摇 文章编号:1000 1522(2018)04 0010 06
引文格式:崔永耀,程玉祥. 基于Cas9/ gRNA创制毛果杨 COBRA3 基因突变体[J]. 北京林业大学学报,2018,40
鄄鄄
(4):10 15. Cui Yongyao,Cheng Yuxiang. Cas9/ gRNA鄄mediated COBRA3 gene mutation in Populus trichocarpa[J].
鄄鄄
Journal of Beijing Forestry University,2018,40(4):10 15.
Cas9/ gRNA鄄mediated COBRA3 gene mutation inPopulus trichocarpa
Cui Yongyao摇 Cheng Yuxiang
(School of Forestry,State Key Laboratory of Tree Genetics and Breeding,Northeast Forestry University,
Harbin 150040,Heilongjiang,China)
Abstract:[Objective] COBRApla
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