产朊假丝酵母增殖发酵及后处理工艺研究-生物化学与分子生物学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 石河子大学学位论文独创性声明及使用授权声明 学位论文独创性声明 本人所呈交的学位论文是在我导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除 王宁已经注明引用的内容外，本论文不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究 营 己重要贡献的个人和集体，均已在文中作了明确的说明并表示谢意。 …名:科 时间: T I如年 6 月 J 日 使用授权声明 工二 人完全了解石河子大学有关保留、使用学位论文的规定，学校有权保留学位论文并向国家主 音茸i丁或指定机构送交论文的电子版和纸质版。有权将学位论文在学校图书馆保存并允许被查阅。 亨 g if 或许可他人将学位论文编入有关数据库提供检索服务。有权将学位论文的标题和摘要汇编 二·孟 s 保 密的学位论文在解密后适用本规定。 此 咋、石t时间 : /jT年 此 咋 、石t d侈时间 :μ/伊年 6 月 f d侈 摘要 摘 要 产朊假丝酵母菌由于具有生长繁殖快、代期短，并且具有高产蛋白速率和动物所必需的八种氨 基酸和 B 族维生素，还拥有丰富的酶系和多种经济价值很高的生理活性物质而被广泛的应用于食品 工业的发酵剂和饮料生产，医药工业的酵母片和重组蛋白药物的表达载体，饲料工业的优质活性蛋 白源。特别是饲料工业以绿色、天然、高效等特点已经广泛应用于畜禽、水产养殖各个方面。 为了获得活性较高的微生物活菌制剂并降低生产成本，本文对产朊假丝酵母的高密度发酵及后 处理工艺进行了详尽的研究。 [1]通过单因素试验对产朊假丝酵母 cu-3 的发酵培养基和发酵条件进行了摇瓶优化实验，采用响 应面方法实验[1]对筛选出影响产朊假丝酵母增殖发酵最大的三个因素做进一步研究，以确定产朊假 丝酵母增殖发酵的最佳发酵培养基和最佳发酵条件。结果优化出最佳的产朊假丝酵母增殖发酵培养 基组成为蛋白胨 36.32g/L，蔗糖 76.17g/L，磷酸二氢钾 1.98g/L，硫酸镁 1.5g/L，硫酸铵 1g/L，最佳 摇瓶发酵条件为装液量 100ml（500ml 三角瓶），温度 28℃，初始 pH5.5，接种量 12%，摇床转速 200r/min。在此条件下发酵的菌液 OD660 可达 0.927，菌体干重可达 11.15g/L，较优化前提高 2.08 倍。 [2]以产朊假丝酵母最优发酵培养基及最优发酵条件为基础，对产朊假丝酵母 cu-3 进行了 10L 发 酵罐分批发酵实验，分别研究了 pH 和溶氧对产朊假丝酵母分批发酵的影响，确定了产朊假丝酵母 10L 发酵罐最优发酵条件。分批发酵实验研究显示，当发酵罐装液量为 7L 时，最佳通气量为 8L/min， 最佳搅拌转速为 300r/min，在此条件下发酵可满足产朊假丝酵母生长对溶氧的需求。最佳发酵控制 pH 为 5.5，选用 NH4OH 自动流加控制。在此基础上发酵可获得菌体干重为 16.43g/L，菌液浓度可达 8.5×1014 个/ml，较优化前提高了 3.06 倍。 [3]为进一步获得活菌数较高的产朊假丝酵母冻干菌粉，进行了产朊假丝酵母菌体离心条件的优 化及真空冷冻干燥保护剂的初步筛选和复配优化研究，筛选出了产朊假丝酵母最佳冻干保护剂的配 方。研究确定了产朊假丝酵母的最佳离心条件为离心转速 6000r/min，离心时间 10min，在此条件下 离心，菌体收得率可达 85.88%；产朊假丝酵母冻干最佳复合保护剂配方为甘油 4%，蔗糖 10%，脱 脂奶粉 8%，在此条件下冻干菌粉存活率可达 65.50%。 关键词：高密度发酵，产朊假丝酵母，分批发酵，真空冷冻干燥，存活率 I Abs Abstract 万方数据 万方数据 Candida utilis have breeding fast,protein yield rate and have animals eight essential amino acids and B vitamins.Candida utilis can be used in fermentation agent and beverage production in the food industry,pharmaceutical industry yeast tablets and recombinant protein drug expression vector,high-quality activity protein source in feed industry.Probiotics has been widely used in livestock and poultry breeding, aquaculture as the advantage of green, natural