基因工程的基本操作程序二幻灯片课件.pptx

基因工程的基本操作程序;一、目的基因的获取;（一）从基因文库中获取目的基因;基因组DNA文库;;①不能转录为信使RNA，不能 编码蛋白质。;;真核细胞的 基因结构;;;基因表达的计算;基因组文库与部分基因文库的关系;基因组文库和部分基因文库的比较;概念辨析;基因组文库的构建模式图;2.基因文库的构建方法;（1）鸟枪法：; 以目的基因转录成的信使RNA为模板，再反转录酶的催化下反转录成互补的单链DNA，然后在DNA聚合酶的作用下合成双链DNA，即cDNA，从而获得所需的基因。 ;（3）根据已知的氨基酸序列合成DNA法 ：;上述三种目的基因提取的方法有何优缺点？;思考： 如何从基因文库中得到所需要的基因？;（二）利用PCR技术扩增目的基因;;;;;;;;① 概念：PCR全称为_______________，是一项 在生物____复制___________的核酸合成技术。 ; 过程：;⑥过程：;思考？;模板DNA 特异性引物 耐热DNA聚合??? dNTPs Mg2+ ;PCR的基本反应步骤;Taq DNA聚合酶（thermus aquaticus);PCR技术扩增与DNA复制的比较;; 根据已知蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测出它的结构基因的核苷酸序列，再通过化学方法，以单核苷酸为原