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第18章 分枝杆菌属 (Mycobacterium) 一类细长弯曲的杆菌,因有分枝生长的趋势而命名 主要特点 细长弯曲,分枝状生长 细胞壁含有大量脂质(分枝菌酸) 常用抗酸染色鉴定,呈抗酸染色阳性 引起疾病都呈慢性,并伴肉芽肿 分类 结核分枝杆菌 非结核分枝杆菌 麻风分枝杆菌 分枝杆菌的分类 抗酸染色 由于细菌细胞壁中含大量脂质,一般不易着色,若经加温或延长染色时间而着色后又能抵抗强脱色剂盐酸酒精的脱色,故又称抗酸杆菌(acid-fast bacilli) 抗酸染色法(acid-fast stain) :以5%石炭酸复红加温染色,再用3%盐酸酒精脱色,然后用美蓝复染,则分枝杆菌呈红色(+),其他细菌和背景物质为蓝色(-)。 第一节??????? 结核分枝杆菌 (Mycobacterium tuberculosis) 结核分枝杆菌 俗称结核杆菌,引起人类结核病 致病菌主要为结核分枝杆菌(M. tuberculosis)、牛分枝杆菌(M. bovis) 世界上1/3人感染,70%在亚洲 世界防治结核病日:3月24日 形态与染色 细长略带弯曲,分枝状,无荚膜,无芽胞,无鞭毛,抗酸染色阳性 培养 特点 专性需氧 生长缓慢 营养要求高,常用罗氏培养基 生长现象 液体:表面生长(菌膜) 固体:颗粒、结节、花菜状菌落,乳白或米黄,不透明 生化反应 不发酵糖类 触酶试验阳性 变异性 形态结构变异: 结核杆菌的L型:颗粒状、丝状、Much颗粒 毒力变异: 卡介苗BCG:Calmette和Guérin将牛分枝杆菌经13年230次传代而获得的减毒活疫苗株 耐药性变异: 耐异烟肼及其他抗结核药物的结核菌株日益增多 所致疾病 感染方式 呼吸道、消化道或皮肤损伤侵入机体 所致疾病 结核病,以肺结核常见 肺部感染 原发感染:外源性感染 多发生于儿童(无免疫力) 原发综合征 ( 肺门淋巴肿大等) 形成结核结节(即结核肉芽肿),少数病灶扩散,引起全身TB 转归 继发感染:外或内源性感染 多见成人 病灶局限 引起局部TB、开放性TB(反应剧烈,干酪性坏死、空洞) 原发性肺结核(primary pulmonary tuberculosis) 其病变特点为原发综合征,即肺原发病灶、结核性淋巴管炎和肺门淋巴结结核。 原发灶:肺中部(上叶下部或下叶上部)近肺膜处,直径约lcm-1.5cm,圆形,灰黄色。 原发灶内结核杆菌沿淋巴管蔓延引起结核性淋巴管炎(X线片可见)肺门淋巴结结核:肺门淋巴结肿大,切面灰黄,严重时多个淋巴结肿大甚至相互融合。 肺结核病的症状以呼吸道症状较为常见,主要是咳嗽、咳痰或痰中带血超过3周,由于毒素的刺激,还会引起神经、内分泌功能紊乱,出现一些全身的症状。如病人常感到疲乏无力、食欲减退、消化不良、消瘦、夜间盗汗、午后发热、两面颊潮红等。 有的小孩还会出现性格改变,易急躁吵闹。 一些女病人还可能出现月经失调或闭经。 结核性胸膜炎的病人可出现胸闷、胸痛气短。 有的病人可表现为高热,常被按感冒治疗而延误就诊。 肺外感染 进入血液循环引起肺内、外播散,如脑、肾、肠、腹腔 大多与结核分枝杆菌L型有关 三、免疫性 免疫机制 主要是以T细胞为主的细胞免疫 属于感染免疫(infection immunity),又称有菌免疫 免疫与超敏反应 细胞免疫为主,迟发型超敏反应同时存在 郭霍现象 注射结核杆菌于豚鼠皮下 初次注射 局部反应小 全身扩散 无免疫无超敏反应 再次注射 局部反应大 不扩散 有免疫有超敏反应 三、微生物学检验 1.标本:清晨第一口痰送检。无菌抽取脑脊液、胸水、腹水及关节液等盛无菌试管送检,采集脓液应直接从溃疡处取脓汁或分泌物。 2.直接涂片染色镜检 痰涂片要厚,齐-尼抗酸染色后,观察至少300个视野,结核分枝杆菌抗酸染色后呈红色,其他细菌和细胞为蓝色。结果应报告“找到或未找到抗酸性杆菌”,而不能报告“找到结核分枝杆菌”。 3.核酸检测 用PCR法快速诊断结核分枝杆菌感染,特异性与敏感性均大于95%。 4.抗PPDIgG的检测 用ELISA法检测患者血清中抗PPDIgG,可作为活动性结核分枝杆菌感染的快速诊断方法,阳性率为80%~90%。 5.分离培养 标本接种于选择性固体培养基中,常用罗 琴培养基,所含的孔雀绿或青霉素可抑制杂 菌生长37℃,5%~10%CO2培养8周,如果出 现干燥呈颗粒状、灰白色菌落,涂片染色为 抗酸阳性,多数是结核杆菌。 6.鉴定 (1)PCR反向膜探针杂交EHSA法(PCR杂交梳) (2)DNA探针 (3)16s rRNA基因序列测定 (4)高效液相色谱(HPLC)检
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