房县小冬菇中香菇多糖的精制 结构鉴定和体外抗肿瘤活性研究-药剂学专业论文.docxVIP

由 D-葡萄糖组成；高碘酸氧化和 Smith 降解实验结果表明 LNT1 和 LNT2 含有(1-3)或 (1-3-6)、(1-6)或末端连接类型的糖残基，各连接类型糖残基的分子摩尔比分别为： 2.73:1 和 2.91:1；甲基化实验结果表明 LNT1 和 LNT2 主要含有末端、(1-3)、(1-3-6)连 接类型的糖残基，各连接类型糖残基 的分子摩尔比分别为： 1.07:1.56:1.00 和 1.00:1.70:1.08；傅里叶红外光谱(FT-IR)分析表明 LNT1 和 LNT2 含有典型的多糖特征 吸收峰，且为 β 构型的 D-吡喃糖；核磁共振实验结果表明 LNT1 和 LNT2 为 β 构型的 葡聚糖，其主链由 1,3-连接的葡聚糖组成，分支点位于 6 位，侧链由末端葡萄糖残基 组成。刚果红实验表明 LNT1 和 LNT2 是三股螺旋结构的多糖，随着 NaOH 浓度的增 大，糖链构象由三股螺旋逐渐解旋为无规则线团。综上所述，LNT1 和 LNT2 是以 β-(1-3)-D 葡萄糖为主链，6 位上带有支链的葡聚糖，平均每 4 个葡萄糖残基组成的重 复单元含有一个分支。基本结构单元为： β-D-Glp 1 ↓ 6 →3) -β-D-Glp-(1→3) -β-D-Glp- (1→3)-β-D-Glp-(1→ 第三部分 香菇多糖 LNT1 和 LNT2 的体外抗肿瘤活性研究 采用四甲偶氮唑盐(MTT)比色法测定 LNT1 和 LNT2 对鼠肝腹水瘤 H-22 细胞增殖 的抑制率。实验结果表明 LNT1 和 LNT2 均能显著抑制鼠肝腹水瘤 H-22 细胞的增殖， 且随着多糖浓度的递增多糖对鼠肝腹水瘤 H-22 细胞的抑制率逐渐增加，当多糖浓度 为 800 μg/mL 时，抑制率达到最高，分别为 52.31%、52.62%，且多糖的浓度与多糖 对鼠肝腹水瘤 H-22 细胞的抑制率之间呈量效依赖性，因此香菇多糖 LNT1 和 LNT2 具 有进一步研究的价值。 [关键词] 香菇多糖；碱提工艺；化学结构；核磁共振波谱；体外抗肿瘤活性 ABSTRACT Lentinus edodes has been valued by humankinds as an edible and medical fungus. A number of bioactive moleculars have been identified, inculuding lentinan which is the best known and most potent substance. As an immunomodulator, Lentinan have an important development and research value because of its small toxicity and good curative effect. In recent years, many researches indicated that some polysaccharides isolated from L. edodes exhibited effects on anti-virus, anti-tumor, regulating the immune system, lowering blood sugar, antioxidant and other functions. Two single molecular weight polysaccharide preparations, LNT1 and LNT2, were isolated from the fruiting bodies of Lentinus edodes (Fangxian.), by extracted with sodium hydroxide, bleached with hydrogen peroxide, fractionated and purified with ultrafiltration. The structure, sugar chains conformation and antitumor activity in vitro are discussed. Part one The extraction and purification of LNT1 and LNT2 The crude polysaccharide was extracted by sodium hydroxide solution, The optimal alkali extraction factors were temperature 25℃, sodium