运用新的体视学方法研究大鼠胼胝体及胼胝体额区.doc

运用新的体视学方法研究大鼠胼胝体及胼胝体额区 有髓神经纤维** *基金项目：国家自然科学基；国家自然科学基金；国家人事部2005年度高层次留学人才回国工作资助经费；教育部留学回国人员科研启动基金；教育部重点项目；重庆市自然科学基金（CSTC,2005BB5034） △通讯作者：唐勇 Email:ytang062@ (023徐玱1,2 杨姝1,2,3 李琛1,2,3 张伟1,2 卢伟1,2 唐勇1,2,3△ 重庆医科大学组织胚胎学教研室，2.重庆医科大学基础医学研究所 3重庆医科大学附属第一医院神经内科，重庆 400016） 摘要 目的 建立定量研究胼胝体体积及胼胝体额区有髓神经纤维的体视学方法 方法 运用卡瓦列里原理计算胼胝体和胼胝体额区体积。采用随机抽样原则在胼胝体额区切取组织块，用“球切法”保证满足三维空间内各向同性抽样原则后，用超薄切片机切取60 nm厚的超薄切片，在透射电子显微镜下从每张切片随机拍摄4个视野。使用无偏计数框计算胼胝体额区有髓神经纤维长度密度，使用等距测试点计算胼胝体额区有髓神经纤维体积密度。胼胝体额区内有髓神经纤维的长度密度和体积密度分别乘以胼胝体额区的体积就得到了胼胝体额区内有髓神经纤维的总长度和总体积。测量所有被无偏计数框计数的有髓神经纤维的直径。与纤维断面的最长轴相垂直的所有横轴中最长的一条横径为其直径。结果 大鼠胼胝体的平均体积（均数±标准差）为70.7±5.64 mm3，胼胝体额区体积为15.3±1.6 mm3，胼胝体额区有髓神经纤维的总长度为16.0±2.28 km，胼胝体额区有髓神经纤维的总体积为9.11±0.44 mm3，胼胝体额区有髓神经纤维髓鞘的总体积为3.91±0.40 mm3。胼胝体额区有髓神经纤维的平均直径为0.58±0.05μm。 结论 本研究建立了定量研究胼胝体体积和胼胝体额区内有髓神经纤维总长度、总体积和有髓神经纤维直径的研究方法，这些研究方法为以后对正常老年和各种神经系统退行性疾病状态下胼胝体改变的研究提提供了可靠有效的研究手段。 关键词 胼胝体 有髓神经纤维 大鼠 体视学 THE APPLICATION OF THE NEW STEREOLOGICAL METHODS TO INVESTIGATE CORPUS CALLOSUM AND THE MYELINATED NERVE FIBERS IN THE FRONTAL REGION OF RAT CORPUS CALLOSUM XU Cang1,2 YANG Shu1,2,3 LI Chen1,2,3 ZHANG Wei1,2 LU Wei1,2 TANG Yong1,2,3△ (1.Department of Histology and Embryology; 2.Institute of Basic Medical Sciences; 3.Department of Neurology, First Affiliated Hospital, Chongqing Medical University, Chongqing 400016) Abstract: Objective To describe the stereological methods for the quantitative studies of corpus callosum and the myelinated nerve fibers in the frontal region of corpus callosum. Methods The volume of corpus callosum and the volume of the frontal region of corpus callosum were estimated using the Cavalieri’s principle. The tissue blocks were obtained from the frontal region of corpus callosum in an uniform random fashion. Isotropic, uniform and random (IUR) sections were ensured by the use of the isector technique. One section with the thickness of 60 nm was cut from each epon block using an ultramicrotome. From each section, four fields of v