二氢杨梅素和盐酸千金藤碱对人牙周膜细胞群增殖以分化能力影响的初步探究-口腔医学专业论文.docxVIP

二氢杨梅素和盐酸千金藤碱对人牙周膜细胞群增殖以分化能力影响的初步探究-口腔医学专业论文.docx

  1. 1、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。。
  2. 2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载
  3. 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
  4. 4、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
  5. 5、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们
  6. 6、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
  7. 7、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
二氢杨梅素和盐酸千金藤碱对人牙周膜细胞群增殖以分化能力影响的初步探究-口腔医学专业论文

学位论文原创性声明 本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研 究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人 或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集 体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。 学位论文作者:  日期: 年 月 日 学位论文使用授权声明 本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属郑州大学。 根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部 门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权郑州 大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索,可以采用影印、 缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学 位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时,第一署名单位仍然为郑 州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。 学位论文作者: 日期: 年 月 日 摘要 目的 本论文的研究的内容是,探索二氢杨梅素和盐酸千金藤碱这两种中药成分, 应用这两种成分来影响我们体外分离培养出的人牙周膜细胞群,观察这两种中药 成分对于我们人牙周膜细胞增殖、总蛋白及碱性磷酸酶活性的影响。探讨此两种 中药成分对于预防及治疗牙周疾病的可能性,为科学合理的推进该两种药的有效 成分在牙周相关疾病的应用提供理论依据。 方法 对于牙周膜细胞群的原代培养的方法,采用的是盖玻片覆盖组织块法。我们 观察这批培养出的细胞的状态,利用倒置显微镜观察培养出的细胞的形状及生长 情况;使用 MTS 法绘制细胞生长的曲线,分别在细胞第 1 天、2 天、3 天、4 天、 5 天、6 天、7 天以及 8 天测牙周膜细胞的 OD 值,绘制 MTS 曲线,观察曲线的走 势,分析细胞的增长;使用免疫组织化学法,目的是来确定所培养出来的细胞是 否是来自于间充质,而没有其他组织的细胞混杂进去;对培养出的细胞进行成骨 诱导 21 天,使用茜素红染色,观察经过诱导过后的所培养出来的细胞是否具有 矿化结节,用来说明所培养的细胞经矿化诱导后可以成骨份化;采用含二氢杨梅 素浓度为 80μmol/L、40μmol/L、20μmol/L、10μmol/L、5μmol/L 的 DMEM 培养 液,以及含盐酸千金藤碱浓度为 10μmol/L、8μmol/L、6μmol/L、4μmol/L、2μmol/L 的 DMEM 培养液,分别采用 MTS 法、考马斯亮蓝染色法、ALP 碱性磷酸酶检 测试剂盒检测后观察不同浓度二氢杨梅素、盐酸千金藤碱对牙周膜细胞群增殖活 性、总蛋白浓度及碱性磷酸酶活性的影响。用 MTS 法使两种药物不同浓度分别作 用于牙周膜细胞群 24h、48h 以及 72h,观察细胞的增殖情况;采用考马斯亮蓝 染色法,将两种药物不同浓度分别作用于牙周膜细胞群 72h,测量牙周膜细胞的 总蛋白含量是否有变化;将不同浓度的该两种药物分别作用于牙周膜细胞,应用 碱性磷酸酶试剂盒,测量药物作用于牙周膜细胞后,其碱性磷酸酶的活性有否增 高。 结果 1、电子显微镜下观察,活性较好的组织块,在镜下观察可见组织块通体呈金黄 色,而活性较差,或者没有贴壁的组织块则镜下观可见组织块漂浮或者发黑。 对于活性较好的组织块,到第 5 天至 10 天,会有细胞从组织块中游出,开始 爬出排列紊乱的细胞,没有任何规则,散布在活性较高的组织块附近,其梭 型、胞体丰满,两头尖尖,与其他细胞相连,此时细胞具有了细长的胞体凸 起。在细胞的正中央,或者附近,可以看到我们的胞核,它的核是圆形或者 椭圆的形状没有完全的规则和统一。MTS 测定显示牙周膜细胞群它的增殖绘 制出的曲线规律是 S 形状;其免疫组化结果:第 3 代 PDLP 其强阳性表达的 为波形蛋白,阴性的表达为角蛋白;PDLP 成骨诱导 21 天后显示有矿化结节 的形成,而没有经过诱导的空白对照组仅有少数结节,多数没有,并且茜素 的红染色呈阳性,且肉眼即可分辨。 2、不同浓度的二氢杨梅素以及盐酸千金藤碱对 PDLP 增殖及总蛋白的影响 (1)MTS 结果显示:含二氢杨梅素 80μmol/L、40μmol/L、20μmol/L、10μmol/L、 5μmol/L 的 DMEM 全培以及含盐酸千金藤碱 10μmol/L、8μmol/L、6μmol/L、 4μmol/L、2μmol/L 的 DMEM 全培分别作用于 PDLP 24 h、48 h、72 h 后,结果 显示各浓度组以及均可促进牙周膜细胞的增殖(P0.05)。 (2)总蛋白量检测: 对于二氢杨梅素以及盐酸千金藤碱作用于 PDLP,PDLP 的总蛋白实验组对 于对照组,有统计学意义(P0.05),但是各实验组之间的浓度没有统计学意义 (P>0.05)。 3、

您可能关注的文档

文档评论(0)

peili2018 + 关注
实名认证
文档贡献者

该用户很懒,什么也没介绍

1亿VIP精品文档

相关文档