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临床微生物学检验标本采集
临床微生物学检验标本的采集 标本采集原则 发现感染应及时采集微生物标本作病原学检查。 尽量在抗菌药物使用前,或停药一周后采集标本,如不能停用抗菌药物,应于下次抗菌药物应用前采集。 应在感染的急性期或伤口局部治疗前采集标本。 选择正确的解剖部位,并以适当的技术、方法与容器收集足量的标本。 采样时应严格执行无菌操作,将污染情形降至最低。 收集真正感染的病灶处的标本,且避免邻近区域常居菌群的污染。 采用专用无菌容器收集标本。标本中不可添加防腐剂。 采样后应立即送检,最好在2h内。如不能及时送检,应将标本置于适当的储存环境待送,但存放一般不能超过24h。 血 液 血培养是把静脉穿刺获得的血液接种到一个或多个培养瓶或培养管中,用来发现、识别细菌或其它可培养分离的微生物(如大肠杆菌、念珠菌属、霉菌属等),这些微生物存在于血液中形成菌血症或真菌菌血症。 血样采集和培养瓶接种 采血指征 ①发热(≥38℃)或低温(≤36℃) ②寒战 ③白细胞增多(>10×109/L,特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多) ④粒细胞减少(成熟的多核白细胞<1×109/L) ⑤血小板减少 ⑥皮肤、粘膜出血 ⑦昏迷 ⑧多器官衰竭 ⑨血压降低 ⑩呼吸加快 皮肤消毒程序 严格执行以下三步法: 70%乙醇擦拭静脉穿刺部位30s以上 1%~2%碘酊作用30s或10%碘伏60s,从穿刺点向外圈消毒,至消毒区域直径达3cm以上 70%乙醇脱碘:对碘过敏的患者,用70%乙醇消毒60s,待乙醇挥发干燥后采血 采血部位 肘静脉 肘动脉或股动脉 骼前(后)上棘 静脉穿刺和培养瓶接种程序 在静脉穿刺前或穿刺期间,为防止静脉滑动,可戴乳胶手套固定静脉,但不可接触穿刺点 用注射器无菌穿刺取血后,勿换针头直接注入血培养瓶 血标本接种血培养瓶后,轻轻颠倒混匀以防血液凝固。 采血量 成人:8~10ml/瓶 儿童:1~5ml/瓶 采血次数和采血时间 只要怀疑血液感染,即刻采集 尽量在使用抗菌药物之前采集 24h内采集2~3次血培养 使用抗菌药物的患者选用能中和或吸附抗菌药物的培养基 间歇性寒战或发热:寒战或发热高峰到来之前0.5~1h、寒战或发热后1h采血 可疑急性原发性菌血症、真菌菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎或肺炎,应在不同部位采集2~3份血标本。 不明原因发热,先采集2~3份血标本,24~36h后估计体温升高之前再采集2份以上。 可疑菌血症或真菌菌血症,但血培养持续阴性,应改变血培养方法,以获得罕见的或苛养的微生物。 可疑细菌性心内膜炎,在1~2h内采集3份血标本,如果24h后阴性,再采集2份血标本。 常见病原体 G+球菌:葡萄球菌、链球菌、肠球菌 G+杆菌:结合分枝杆菌、产单核李斯特菌、阴道加特 纳菌 G-球菌:脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他布兰汉菌 G-杆菌:大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、克雷伯菌、肠 杆菌、变形杆菌、沙雷菌、沙门菌、不动杆 菌、嗜肺军团菌、嗜血杆菌 真 菌:念珠菌、曲霉菌、隐球菌、球孢子菌 厌氧菌:拟杆菌、产气荚膜梭菌 概念:少量细菌侵入血液循环,为一过性,不繁殖或很少繁殖,不引起或仅引起轻微的炎症反应。 有菌血症的患者,不一定会出现临床症状,也不一定需要抗生素治疗。 根据细菌进入血液的机制不同,可分为 暂时性菌血症:通常为人体正常菌群进入到血液中。 间歇性菌血症:细菌来自血管外的脏器、组织或扩散性感染(化脓性关节炎、腹膜炎、蜂窝组织炎),断断续续将细菌释放到血液之中。 持续性菌血症:通常为感染源直接感染血液系统。 脓毒症(sepsis) 概念:血液或其他组织因致病菌或其毒素而产生全身性炎症反应的表现。 血液感染特点 危重的全身感染 耐药菌、条件致病菌、非致病菌感染显著增多 死亡率高 常见的菌血症或脓毒症 葡萄球菌菌血症 病原体:MRSA及凝固酶阴性葡萄球菌 特点: 临床表现明显、发病急、中毒症状重 常由原发感染灶继发为菌血症和脓毒症,也可由呼吸道感染引起 常可引起迁徙性损害,并发心内膜炎等 肠球菌菌血症 病原体:肠球菌 特点: 常见于泌尿生殖道、消化道和腹腔感染的病人 易并发心内膜炎 常对多种抗菌药物耐药,病情较重 革兰阴性杆菌菌血症 病原体:革兰氏阴性杆菌 特点: 主要侵犯危及机体免疫功能低下的病人 常引起泌尿生殖道、胃肠道、胆道及呼吸道感染 大面积烧伤及严重创伤病人可发生铜绿假单胞菌菌血症 感染严重者可引起感染性休克和DIC,甚至出现多脏器功能衰竭 厌氧菌菌血症 病原体:厌氧菌(常见脆弱拟杆菌) 特点 常合并需氧菌感染,临床症状较重而复杂 常引起口腔、肠道、泌尿生殖道感染 肝硬化、糖尿病、尿毒症、恶性肿瘤和新生儿易发生厌氧
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