医学论文食管与胃贲门癌前病变的P53ylin1.docVIP

民学论文食管与胃贲门癌前病变的P53CyclinDi聚积与细胞增殖的比较研宄 目的探讨食管与胃贲门癌前病变的P53Cyclin 聚积与细胞增殖的关系。 方法 在普查与随防中收集的237 例无症状受检者的食管与胃贲门粘膜活检组织，进行病理学分析。 结果食管与胃贲门的P53, CyclineD与PCNA的免疫组化在不同 病变的上皮细胞核内部都可见明显的染色反应。 结论 P53蛋 內的失活可导致基因的异常表达，肿瘤抑制活性的破坏最终导致使细 胞生长失控，但P53蛋0质的性质仍稳定不变，故可用免疫组化显示 其蛋白的聚积。组织学表现为食管与胃贲门粘膜上皮，其P53的阳性 频率与单位面积内阳性表达的数量，都与无症状右进展倾向的轻度异 常病变一致，故认为P53聚积与突变可能是证明肿瘤发生的危险度与 干预治疗效果的生物标记。 关键词：肿瘤 突变 鉴别诊断 食管癌与胃贲门癌的中晚期期患者都具有共同的临床症状，即 吞咽困难，因此在食管癌高发区的发病与死亡率统计，实际上都包含 上述两种癌症。进行内窥镜的普查，经组织病理学证实食管与胃贲门 的癌前病变与早期癌的发现率都比较高。Para等报道美国70-80年代 的食管与胃贲门部腺癌的发病率递增迅速。 食管/贲门癌的发病因素尚不清楚，但根据以往的组织发生学研 究表明，食管上皮的恶变是呈现多阶段的发展过程，食管上皮的癌前 期异常改变，包括基底细胞增生、间变与原位癌，并认为这些病变具 右逆转的特点。虽然右些“好转”可能是由于粘膜活检取材的秉复性 不够引起，但多数是真正的逆转，有关癌前病变逆转过程的了解甚少。 是否有些类型的基底细胞增生与间变上皮是可逆性的而另一些类型 则倾向癌的发展？其原因又是什么？某些基因改变（如癌基因活化与 抑癌基因的消失）可能是导致继续向癌发展的可能性。人体许多部位 （包括食管/贲门）癌症都发现P53蛋白聚积与P53基因突变机率增 高。P53蛋白的失活可导致基因的异常表达，肿瘤抑制活性的破坏最 终导致使细胞生长失控，但P53蛋A质的性质仍稳定不变，故可用免 疫组化显示丼蛋G的聚积。最近Jiang等，报道了食管癌的Cycline D, 基因表达的改变。有关胃贲门腺癌的组织发生过程中的分子生物学研 究资料很少。但文献证实胃贲门腺癌的病期过程、危险因素以及组织 发生学的胃粘膜其他部位发生的腺癌有区别。 本文观察出现于同一例无症状受检者的各类食管与胃贲门的癌 前期上皮改变与癌的P53, Cycline D,与PCNA的免疫组化及其相互 关系。 材料与方法 标本采集与处理：在普查与随防中收集的237例无症状受检者 的食管与胃贲门粘膜活检组织，其中男性146例（年龄21-74,平均 47±13），女性91例（年龄16-71,平均44±16）。少数观察对象（17 例）因活检组织太小而排除，故食管粘膜活检总计为220例，其中 28例观察对象同时采集食管与胃贲门粘膜活检组织。手术切除的食 管鳞状细胞癌与胃贲门腺癌各10例。所有标本都以80%酒精固定与 石蜡包埋，作3um厚度的切片，分别作HE常规与免疫组化染色。 组织病理学分析：根据食管上皮细胞与组织结构的改变，按作 者等过去报道分为：正常、基底细胞增生（BCH）、间变（Dys）与 鳞状细胞癌（SCC）类。胃贲门粘膜上皮分下述5类：⑴慢性浅表性 胃炎（CSG），表现为贲门粘膜内有较多的淋巴浆细胞浸润。⑵慢性 萎缩性胃炎（CSG），即胃贲门粘膜固右腺呈现不同程度的消失，并 以结缔组织替代与腺管间有不同程度的淋巴浆细胞浸润。0^）肠上皮化 生（IM），主要表现胃腺粘膜上皮不同程度的为肠上皮（杯状细胞） 替代。⑷间变（Dys），胃粘膜上皮与腺体呈现不同程度的异型性，但 基底膜完整。⑸腺癌（AC）：癌变的胃上皮细胞己穿透基底膜。在230 例食管标本中，正常4例，BCH 161例，Dsy 35例，SCC 10例， 55例胃贲门粘膜标本中，正常9例，CSG18例，CAG13例，Dys与 与IM者共5例，AC 10例。免疫组化染色用ABC法（Vectastain Elite 药盆），使用二种（即Ab-2与Ab-6）人P53单克隆抗体（由美国 Oncogene Science提供）。实验第一步同时使用上述两种抗体，若呈现 相同结果，再进一步用Ab-6予以秉复。抗Cyclin D1抗体力多克隆 免抗人Cylin D （美国UpstateBiotecnology公司产品）。检测人增生细 胞抗原（PCNA）的PC10为单抗（Dako产品）。切片孵育使用的P53, Cyclin D1与PCNA 的浓度分别为：1: 1000，1: 50 与 1: 200。 免疫组化染色的定景分析：在低倍镜下对半连续切片中选择组 织包埋方向正确，切片铺展平整，细胞与组织结构清晰以及染色均一 者为