信号放大时间分辨荧光分析技术的研究进展及应用..docVIP

信号放大时间分辨荧光分析技术的研宄进展及应用 】信号放大时间分辨荧光分析技术是一种新型 的超微量的标记分析技术。它是以生物信号放大为基础，以 镧系元素螯合物为标记物，以时间分辨和波长分辨为测量方 法，充分利用了酶标记分析和PCR扩增等分析技术优点的技 术。它的独特优点是非同位素和超灵敏度。本综述介绍了 T RFA的特点以及酶放大、二次酶放大、铕纳米颗粒、滚动循 环放大、免疫PCR和荧光淬灭分析等信号放大时间分辨荧光 分析技术的研究进展及应用。信号放大时间分辨荧光分析技 术在生物分析中极其广泛的应用，显示出具有很好的发展前 景。论文联盟编辑。 关键词】信号放大；时间分辨荧光分 析；镧系元素螯合物 Studiesandapplicationsoftime-resolve Studiesandap plicationsof time-resolve dfluorescenc eassaybasedo nsignalampli fication Ab stract] Time -resolvedflu orescenceass ies (TRFA)bas edonsignalamplificationa renewultrase nsitivelabel lingassaytec hnologies. Th ebasisisbios ignalamplifi cation,thela belsarelanth anidechelate s,andthedete ctionmethods arethetime~r esolvedandwa velength-res olvedfluores cenceassayin theaddition, enzyme-label ledassayandP CRamplificat ionetalareus edintheseveralmainsignal amplificatio nmethodsanda mplification o-roundenzym nanoparticalCRandfluoress,forexample ,enzyme-amp1 ification,tw e-amp1i f i cat mplification o-roundenzym nanopartical CRandfluores ,rollingcirc leamplificat ion,immuno-P cencequenchi ngassayetal, wereintroduc edinthesumma ry. Theunique advantagesof nonisotopean dultrasensit ivityandexte nsiveapplica tionsinbioas sayshowngood prospectsofT RFAbasedonsi gnalamplific ation. [Keyw ords] signal amplificatio n；time-resol vedfluoresce nceassay； lan thanidechela te 近些年来，非同位素标记分析技术发展迅速。它主要包 括：酶标记分析技术、化学发光分析技术、生物发光分析技 术和时间分辨荧光分析技术。信号放大时间分辨荧光分析技 术克服了其他技术的缺点，具有非同位素、灵敏度高、标记 物制备简单、测量快速和分析动态范围宽等优点，成为一种 最有发展前途的非同位素标记分析技术。 1信号放大时间分辨荧光分析技术的原理及特点 信号放大时间分辨荧光分析技术是把生物信号放大、镧 系元素螯合物的固有优点以及时间分辨和波长分辨两种测 量技术合为一体，极其有效地排除了非特异荧光，测量了特 异荧光，因而灵敏度很高。 信号放大时间分辨荧光分析技术的优点归根到底是源 于镧系元素螯合物的固有特点［1］。它们是：（1）激发光谱 带较宽，可以增加激发能，提高标记物的比活性。（2）发射 光谱带很窄，50%发射谱带的宽仅约为10nm，可以利用通带 滤光片，只允许峰值波长±5nm谱段通过供测量，在如此窄 的谱段内，非特异荧光很少，可有效降低本鹿荧光，且能量 损失也不大。（3）激发光与发射光之间的stok es位移大，有 利于排除激发光散射等的干扰。（4）镧系离子螯合物的荧光 寿命很长，约lms，在时间分辨荧光仪上测量时，脉冲光源激 发后，可适当延迟一段时间，待其他短半衰期的非特异荧光 完全衰变后再测量，从而极大的降低了本底荧光，实现了时 间分辨，灵敏度大大提高。（5）镧系离子由激发态跃迁到基 态时发射荧光，在测量时间内可反复激发镧系离子，相当于 大大提高了标记比活性。 此外，时间分辨荧光分析技术的分析动态范围宽，可迗 4?5个数量级；标记