思考2如何测定纤维素酶活性.PPT

取样 选择培养 梯度稀释 取样涂布 微生物的培养与观察 微生物实验室分离纯化步骤及鉴定 对比尿素分解菌分离纯化和纤维素分解菌分离与纯化 纤维素分解菌的分离 1.土壤取样 ↓ 2.选择培养 ↓ 3.样品稀释 ↓ 4.取样涂布 尿素分解菌的分离 1.土壤取样 ↓ 2.样品稀释 ↓ 3.取样涂布 思考：选择培养的目的是什么？在所有实验中均需要做么？ 真题3、4 一些菌落的形态 三、微生物的鉴定 对比尿素分解菌和纤维素分解菌的鉴定方法 尿素分解菌的鉴定 纤维素分解菌的鉴定 思考1：如何筛选出纤维素酶活性高的菌落？ 真题5、6 滤纸片抗生素抑菌实验 采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素的产物 进行定量测定。 思考2：如何测定纤维素酶活性？ 葡萄糖 思考：是用葡萄糖生成量的多少来衡量酶活性的高低么？ 真题8 1、显微镜直接计数： 利用血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。 四、微生物的计数 不能区分死菌与活菌 缺点 2.稀释涂布平板法（活菌计数法） ⑴原理：在样品稀释度足够高时，固体培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。 思考： 1.分离不同的微生物采用的稀释度相同么？稀释度的确定根据的是什么？ ? 2.测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围相同吗？如果不同，哪个稀释度应该较大？ 操作 实验组 对照组 判断培养基中是否有杂菌污染 判断选择培养基是否具有筛选作用 选择培养基 接种 选择培养基 不接种 选择培养基 接种 牛肉膏蛋白胨培养基 接种 需将未接种的选择培养基同时进行培养 需制备牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养，观察两种培养基上菌落数目、进行对比得出结论 实验设计原则 (1)设置重复组： 增强实验结果的说服力与准确性。 (2)设置两种对照组 真题9、10 五、菌种的保藏 临时保藏法 甘油管藏法 1.适用情况 适用于 菌种 适用于需要 保存的菌种 2.方法 接种到 培养基上 将1ml菌液和1ml 混合 3.保存条件 ℃冰箱 ℃冷藏箱中保存 4.不足 菌种容易 频繁使用 永久 固体斜面 灭菌甘油 4 -20 污染和变异 真题11 课堂小结 课后练习题 (2017江苏卷)苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。小明同学准备依据下图操作步骤，从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题: （1）酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作为碳源的有_____________。 （2）将采集到的样品接种培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐_____________，以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集，应进一步_____________，以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外，还必须添加_____________。 （3）下图为连续划线法示意图，在图中_____________ （填图中序号）区域更易获得单菌落。 蛋白胨、苯酚 增多 梯度稀释和涂布 琼脂 ③ 本专题知识体系 微生物的实验室培养 培养基 无菌技术 微生物的常 用接种方法 培养基的类型 培养基的营养物质 实验室常用的消毒方法 实验室常用的灭菌方法 平板划线法 稀释涂布平板法 真题1、2 平板划线法 稀释涂布平板法 二、微生物的分离纯化 分离纯化的目的：获得单个菌落