酶促反应速度升高.PPT

第 四 章 酶 学习导航 概述 酶的命名和分类 酶的作用机制 影响酶促反应的因素 酶的分离提纯及活力测定 酶的概念 酶学研究简史 公元前两千多年，我国已有酿酒记载。 一百余年前，Pasteur认为发酵是酵母细胞生命活动的结果。 1877年，Kuhne首次提出Enzyme一词。 1897年，Buchner兄弟用不含细胞的酵母提取液，实现了发酵。 1926年，Sumner首次从刀豆中提纯出脲酶结晶。 1982年，Cech首次发现RNA也具有酶的催化活性，提出核酶(ribozyme)的概念。 1995年，Jack W.Szostak研究室首先报道了具有DNA连接酶活性DNA片段，称为脱氧核酶(deoxyribozyme)。 第一节 概述 一、酶是生物催化剂 1、酶与一般催化剂的共同特点 用量少而催化效率高 不改变化学反应的平衡点 可降低反应的活化能 一、酶是生物催化剂 2、酶作为生物催化剂的特征 酶易失活：要求反应条件温和 催化效率高 酶的催化效率通常比非催化反应高108～1020倍，比一般催化剂高107～1013倍。例： 1mol过氧化氢酶1min催化5×106mol,而Fe2+只能催化6×10-4 高度专一性 活力可调节 酶专一性类型 绝对专一性和相对专一性 消化道内几种蛋白酶的专一性 2、酶的化学组成 结合酶 (conjugated enzyme) 酶的不同形式 单体酶(monomeric enzyme) 寡聚酶(oligomeric enzyme) 多酶体系(multienzyme system) 多功能酶(multifunctional enzyme)或串联酶(tandem enzyme) 一、分类 国际酶学委员会（enzyme commission,EC)将所有的酶促反应分为六大类： （1）氧化-还原酶 （2）转移酶 （3）水解酶 （4）裂合酶 （5）异构酶 （6）合成酶 1、习惯命名 根据作用的底物, 反应类型,底物加反应类型等命名。 2、系统命名 要给出所有的反应底物及反应性质，如： 转氨酶（习惯名）→丙氨酸：α-酮戊二酸氨基转移酶（系统名）。 习惯名称简便故常用。 第三节 酶的作用机制 三、 同工酶 五、酶的催化作用机制 1、中间产物学说 ES稳定性差，只能存在，不能分离出来。 2、酶作用专一性机理 酶专一性的“锁钥学说” 酶专一性的“诱导契合学说” 3、与酶的高效率有关的主要因素 3、与酶的高效率有关的主要因素 酶分子中可作为亲核基团和酸碱催化的功能基团 第四节 概念 研究各种因素对酶促反应速度的影响，并加以定量的阐述。 影响因素 酶浓度、底物浓度、pH、温度、抑制剂、激活剂等。 一、底物浓度对反应速度的影响 单底物、单产物反应 酶促反应速度一般在规定的反应条件下，用单位时间内底物的消耗量和产物的生成量来表示 反应速度取其初速度，即底物的消耗量很小（一般在5﹪以内）时的反应速度 底物浓度远远大于酶浓度 2、Km与Vmax的意义 Km值 1、 Km等于酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度、是酶的特征性常数之一； 2、 Km可近似表示酶对底物的亲和力； 3、Km值可判断酶的最适底物， 同一酶对于不同底物有不同的Km值； 4、Vmax是酶完全被底物饱和时的反应速度，它与酶浓度成正比。 Vmax 定义：Vm是酶完全被底物饱和时的反应速度，与酶浓度成正比。 3、Ｋm值与Ｖmax值的测定 双倒数作图法(double reciprocal plot)，又称为 林-贝氏(Lineweaver- Burk)作图法 二、酶浓度对反应速度的影响 当[S]＞＞[E]，酶可被底物饱和的情况下，反应速度与酶浓度成正比。 关系式为：V = K3 [E] 三、温度对反应速度的影响 双重影响 温度升高，酶促反应速度升高；由于酶的本质是蛋白质，温度升高，可引起酶的变性，从而反应速度降低 。 五、抑制剂对反应速度的影响 酶的抑制剂 凡能使酶的催化活性下降而不引起酶蛋白 变性的物质称为酶的抑制剂。 抑制剂类型和特点 1、 不可逆性抑制作用 * 概念 抑制剂通常以共价键与酶活性中心的必需基团相结合，使酶失活。 * 举例 有机磷化合物 ?? 羟基酶 解毒 -- -- -- 解磷定(PAM) 重金属离子及砷化合物 ?? 巯基酶 解毒 -- -- -- 二巯基丙醇(BAL) 2、 可逆性抑制作用 * 概念 抑制剂通常以非共价键与酶或酶-底物复合物可逆性结合