hplc法测定鹅绒藤中两种黄酮类成分的含量.docVIP

HPLC法测定鹅绒藤中两种黄酮类成分的含量 摘 要 目的：建立测定鹅绒藤中小麦黄素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷，紫云英苷含量的方法。方法：采用HPLC法，使用Cosmosil AR-Ⅱ-C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱；流动相为0.6%磷酸溶液（A）-乙腈（B），梯度洗脱（0～12 min，18% B；12～15 min，18% B→20% B；15～30 min，20% B），流速1 mL·min-1，柱温35°C；检测波长360 nm。结果：小麦黄素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、紫云英苷的线性范围分别为1.188-17 μg（r=0.9992），0.087-1.74 ug（r=0.9991）；平均回收率分别为97.25 关键词：HPLC；鹅绒藤；小麦黄素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷；紫云英苷 Content Determination of two Flavonoids in Cynanchum chinense R. Br. by HPLC ABSTRACT OBJECTIVE: To develop a method for the determination of tricin-7-O-β-D-glucuronide and astragalin in Cynanchum chinense R. Br. METHODS: HPLC method was adopted. This analysis was performed on a Cosmosil AR-Ⅱ-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm); The mobile phase was 0.6% phosphoric acid solution (A)-acetonitrile (B) with the gradient elution (0～12 min, 18% B; 12～15 min, 18% B→20% B; 15～30 min, 20% B) at a flow rate of 1 mL·min-1; the column was maintained at 35°C, and the detecting wavelength was set at 360 nm. RESULTS: The linear ranges were 1.188-17 μg (r=0.9991) for tricin-7-O-β-D-glucuronide and 0.087-1.74 μg (r=0.9991) for astragalin; The average recoveries (n=9) of two components were 97.25% and 96.26%, respectively. CONCLUSION: The developed method is rapid, accurate with high repeatability and suitable for quantitative analysis of tricin-7-O-β-D-glucuronide KEY WORDS HPLC; Cynanchum chinense R. Br.; tricin-7-O-β-D-glucuronide; astragalin 鹅绒藤（Cynanchum chinense R. Br.）系萝摩科（Asclepiadaceae）鹅绒藤属植物，药用根及新鲜茎的乳汁，根祛风解毒、健胃止痛，乳汁外敷可治疗疣赘[1]，全草入蒙药[2]。文献报道鹅绒藤全草水提物对试验动物具有抗惊厥、中枢抑制[3]和镇静催眠作用[4]。可见鹅绒藤除其块根部分外，其它没有充分利用的部分有可能含有有效药用成分。作者的前期研究结果表明该植物地上部位具有一定的抗炎活性，且地上部位作为一种可再生利用的植物资源，具有开发应用潜力。文献研究发现，鹅绒藤地上部位中有黄酮类化合物存在，但至今未见其化学成分含量测定的文献报道。本文采用高效液相色谱法同时测定鹅绒藤中小麦黄素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、紫云英苷的含量，实验表明该方法准确、快速、可靠，为进一步发开利用鹅绒藤提供依据。 1 仪器与试药 Agilent 1260 Infinity Series高效液相色谱仪，包括二元泵（DEABL00396），柱温箱（DEAAK04580），紫外检测器（DEABG00577）和Agilent 色谱工作站（B.04.03）。 小麦黄素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、紫云英苷对照品通过对鹅绒藤的化学成分研究分离得到，他们的1H-NMR及13C-NMR数据与文献报道一致，通过HPLC面积归一化法检验，其纯度大于98%。鹅绒藤地上部分于2010年采自新疆自治区石