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硒形态分析的研究进展 　　摘要：综述了近年来关于微量元素硒形态分析领域取得的最新研究成果，尤其是联用技术在硒形态分析中的应用，主要包括不同的样品前处理方法以及形态分析所取得的结果。 　　关键词：硒；形态分析；联用技术 　　中图分类号：Ｓ１３２文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）03－0437-05 　　 　　Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｏｆ Ｓｅｌｅｎｉｕｍ Ｓｐｅｃｉａｔｉｏｎ Ａｎａｌｙｓｉｓ 　　 　　ＬＩ Ｎａ1，ＷＡＮＧ Ｘｕ2，ＳUN Fａｎｇ－ｆａｎｇ2，ＨE Wｕ2，ＬI Lｉ2，ＹANG Hｕｉ2，ＷAN Kａｉ2，ＷＡＮＧ Ｆｕ－ｈｕａ2 　　（1.Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ Ｃｏｌｌｅｇｅ， Ｈｕａｚｈｏｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Wuhan 430070，China； 　　2.Ｓｕｐｅｒｖｉｓｉｏｎ ａｎｄ Ｔｅｓｔｉｎｇ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｖｅｇｅｔａｂｌｅｓ ａｎｄ Ｆｒｕｉｔｓ Ｑｕａｌｉｔｙ，Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ， Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ ５１０６４０，Ｃｈｉｎａ） 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｉｓ ａｒｔｉｃｌｅ ｇａｖｅ ａ ｒｅｖｉｅｗ ａｂｏｕｔ ｔｈｅ ｌａｔｅｓｔ ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｏｎ ｓｐｅｃｉａｔｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｍｉｃｒｏｅｌｅｍｅｎｔ―Ｓｅｌｅｎｉｕｍ（Ｓｅ）， ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙ ｔｈｅ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｙｐｈｅｎａｔｅｄ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ，ｍａｉｎｌｙ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ ｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｔｈｅｓｅ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Sｅｌｅｎｉｕｍ； ｓｐｅｃｉａｔｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ； ｈｙｐｈｅｎａｔｅｄ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ 　　 　　硒是人体必需的微量元素。人体内含有多种以硒化合物为活性中心的酶，如红细胞谷胱甘肽过氧化物酶（ＲＢＣ ＧＳＨ－ＰＸ）、磷脂氢过氧化物谷胱甘肽过氧化物酶（ＰＨＧ－ＰＸ）、血浆谷胱甘肽过氧化物酶（ＰＧＳＨ－ＰＸ）。这些酶具有抗氧化作用、提高红细胞的携氧能力、提高人体免疫机能等重要的生物功效。人体缺硒会导致克山病、大骨节病等地方病，血硒水平偏低会引起癌症死亡率升高，因此硒享有“生命的火种”“具有保健作用的神奇矿物”的美誉。 　　但硒同时也是一个典型的双功能元素。适量的硒有利于人体健康，但摄入硒过量会导致人体多种中毒症状。１９６０年，在湖北恩施发现一种临床表现为“毛发脱落，指（趾）甲损害，皮肤损害，神经系统损害”的症状，现在已经确认该病为地方性硒中毒，是当地自然环境和农作物含硒量过高所引起的。美国生物学家Ｊｏｓｅｐｈ认为，“硒在所有具有毒性的化学制品中具有最狭窄的安全和危险界限”。 　　硒所具有的重要生物功能使其成为功能性食品的青睐元素，但由于硒的摄入量存在限值，比如英国规定人体每日的硒摄入量不能超过７０ μｇ，而中国营养学会推荐的日摄入量为１００～２４０ μｇ，所以对食品和营养强化剂中硒含量的检测是食品安全领域的热点。但是研究表明，硒的营养性和毒性、在环境中的迁移转化规律，不仅取决于硒的总量，同时更取决于它的形态。但是形态分析比传统的总量分析复杂很多，因为大多数食品中硒含量比较低，而且在前处理的过程中硒容易挥发和转化。为了克服这些难题，近些年来，科技工作者从新技术手段的引用（主要表现为分析仪器的联用技术）、前处理的改进等方面对食品中硒的形态分析做了大量工作，以实现对不同基质的食品进行准确、高效的定量和定性分析。 　　１不同基质样品的前处理 　　对于生物体样品，前处理方法相对比较简单。血浆、乳清和尿液等样品经过过滤和稀释可直接进入色谱柱。含硒的氨基酸多为水溶性，用热水可浸取出与大分子结合的硒化合物。样品用水搅匀，经超声振荡加热处理和超声离心，硒浸取率约为９０％。含硒氨基酸还可用超滤或透析分离。在实验中发现，某些含硒氨基酸容易氧化降解，用羟甲基衍生物可以对其加以稳定，以防降解。在分析鼠尿样品中的硒含量时，Ｙａｓｕｍｉｔｓｕ等［１］指出必须对样品进行纯化，去除ＮａＣｌ和脲以满足ＥＳＩ?CＭＳ的测定要求。 　　在对植物性样品进行分析时，根据不同的分离、检测目的，所采用的前处理方法也有差异。Ｅｍｅｓｅ等［２］用酶水解胡萝卜样品以提取蛋白硒和非蛋白硒，离心分离测定硒的各种形态。实验表明，胡萝卜的叶子和根中硒的提取率分别是（７５±２）％和（７８±３）％（ｎ＝３），检测限是４５ ｎｇ／ｇ（８０Ｓｅ）。Ｓａｓｉ等［３］在测定巴西干果中的硒形态时，采用了先去除脂肪，然后利用蛋白酶进行水解的方法，提取效