人类和动物！#病毒反向遗传系统.PDFVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ’( )! *’ ) # 年 月 !$ % !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 +,- !$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 人类及动物!# 病毒的反向遗传系统 黄耀伟 李 龙 于 涟 （浙江大学动物预防医学研究所，杭州 #/!6 ） 摘 要 反向遗传系统可以对M*N 病毒直接进行遗传操作，为M*N 病毒的分子生物学研究提供了一种强大的工 具。在过去 年，特别是自 年代中期第一例负链 病毒感染性克隆构建成功以来，动物 病毒的分子生 ! 6 M*N M*N 物学研究取得了长足的进展，这很大程度上归功于各种动物M*N 病毒反向遗传系统的建立。这里系统总结了人 类及动物非反转录M*N 病毒中各类代表性成员在建立反向遗传系统时的方案设计、遇到的困难及研究者如何克 服这些困难。分类讨论到的代表性病毒种属有脊髓灰质炎病毒、冠状病毒（包括JNMJ 病毒）、黄病毒、野田村病毒、 流感病毒、传染性法氏囊病病毒以及呼肠孤病毒等。 关键词 人类及动物M*N 病毒，反向遗传，感染性克隆，拯救，微基因组 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） O6#6 P$ N /.#4/ !$ #.#//.0 病毒的反向遗传（ ）系统，是采用病 段），其复制的分子机制差异较大，早期的拯救策略对于结构 M*N C3L3CI3 D3=3F;BI 毒的遗传材料，在培养细胞或易感宿主中重新拯救（ ） 复杂的病毒如流感病毒、呼肠孤病毒难以奏效。本文将详细 C3IB3 综述各类代表性动物（包括人类） 病毒反向遗传系统的 出活病毒或类似病毒物质。能够拯救病毒的遗传材料称为 M*N 感染性克隆，一般是在细菌质粒中含有整个病毒基因组的 最新进展。 BQ*N 拷贝，使得BQ*N 本身或从BQ*N 体外转录所得的M*N $ M*N 病毒反向遗传系统的构建原则和各 具有感染性。M*N 病毒的反向遗传系统通过定向修饰病毒 类表达体系 的基因组序列，检测被拯救的人工改造病毒的表型，可以在 体内（ ）有效地研究病毒基因结构、功能和病毒 宿主相 目前，对不同的M*N 病毒反向遗传系统的构建没有固 #$ 3#3( . 互作用。自 年第一例 病毒 噬菌体的成功拯救 定的程序，但有基本的构建原则。 /650 M*N O! ［］ / 一般来说，对长度较小（ 以下）的正链 病毒，可 以来 ，各类M*N 病毒的分子生物学研究取得了长足的进