常见的出凝血疾病的检测.pptVIP

中国医学科学院血液病医院 临床检测中心止血血栓室 孙海燕 出凝血疾病的检测 生理性止血 血管损伤 血凝块形成与维持 加固 抗凝系统 纤溶系统 XII XIIa XI XIa IX IXa X Xa II IIa I Is Ii XIII XIIIa VII VIIa VIII VIIIa TF +Ca2+ 前激肽释放酶 激肽释放酶 丢失不引起出血 Va V Ca2+ PL HMW-K PL 凝血瀑布 凝血因子活性测定 项目 结果 单位 参考范围 PT 16.9 S 11-14 INR 1.47 0.87-1.2 APTT 109.4 S 23.7-36.0 TT 16.1 S 13.3-19.3 FIB 3.93 g/L 2-4 FVIII 56.8 % 50-150 FIX 39.2 % 50-120 FXI 41.3 % 50-120 FXII 27.0 % 50-120 DRVVT筛选 143.4 S 31-44 DRVVT确认 56.4 S 30-38 DRVVT比值 2.5 0.8-1.2 结论 提示狼疮抗凝物存在。 凝血因子活性测定 原理：凝血因子活性是通过其纠正乏该因子血浆所致的凝固时间延长的能力而测得的。梯度稀释已知凝血因子活性的血浆（标准品），与乏该因子的血浆混合，然后做APTT或PT测定，建立参考曲线。受检者血浆与乏该因子的基质血浆混合，测其APTT后PT值，通过标准曲线可计算其凝血因子的活性。 因子缺乏或者假性降低：3个浓度 当存在狼疮抗凝物等非特异性抗体时，凝血因子活性测定呈现稀释效应 凝血因子活性测定 项目 结果 单位 参考范围 PT 16.9 S 11-14 INR 1.47 0.87-1.2 APTT 109.4 S 23.7-36.0 TT 16.1 S 13.3-19.3 FIB 3.93 g/L 2-4 FVIII ≥120.1（56.8；108.6） % 50-150 FIX ≥119.4（39.2；75.6） % 50-120 FXI ≥102.3（41.3；71.6） % 50-120 FXII ≥59.4（27.0；47.5） % 50-120 DRVVT筛选 143.4 S 31-44 DRVVT确认 56.4 S 30-38 DRVVT比值 2.5 0.8-1.2 结论 提示狼疮抗凝物存在。 项目 结果 单位 参考范围 PT 11.6 S 11-14 INR 0.95 0.87-1.2 APTT 129.9 S 23.7-36.0 TT 15.5 S 13.3-19.3 FIB 4.45 g/L 2-4 DRVVT筛选 39.8 S 31-44 DRVVT确认 32.6 S 30-38 DRVVT比值 1.2 0.8-1.2 结论 不提示狼疮抗凝物存在 FVIII 1（1;1） % 50-150 FIX ≥84.9（19.9；52.2） % 50-120 FXI ≥94.3（19.4；52.4） % 50-120 FXII ≥23.8（8.7；18.0） % 50-120 VIII因子抑制物定量：489 Bethesda 纠正试验 反应管 APTT（或PT） APTT（或PT） APTT（或PT） 正常人混合血浆 正常 正常 正常 患者血浆 延长 延长 延长 正常+患者血浆即刻混合 正常 延长 正常 正常+患者血浆37℃孵育2H后 正常 延长 延长 解释 提示凝血因子缺乏 提示即时作用抗体存在 提示时间依赖性抗体存在 狼疮抗凝物实验室诊断标准 延长的磷脂依赖的凝固时间：APTT、DRVVT、SCT、dPT等 抑制的证据：纠正试验 延长是磷脂依赖的：DRVVT（或SCT）证实试验、PNP等 除外其他的循环抗凝物：因子特异性抗体、DTI、肝素、华法令等 补充检测：抗心磷脂抗体、抗β2糖蛋白1抗体 *ISTH LA-SSC, 1995 (TH 74:1185) 2009 (JTH 7:1737-40); CLSI H-60A (2014) DRVVT （或SCT） DRVVT Screen RVV PL (restricted) 肝素中和剂 DRVVT Comfirm RVV Excess PL 肝素中和剂 阳性：DRVVTScreen/DRVVT Comfirm 1.2 未稀释 1:1 1:2 1:4 1:8 取0.2ml+0.2mlNPP 37℃孵育2小时 0.2mlNPP+0.2ml咪唑 检测因子活性 计算滴度 患者血浆 Bethesda Assay操作步骤 抑制物滴度 凝血四项 获得性缺乏 因子特异性抗体 一期止血 一期止血 血小板实验室检测 数量：血小板计数、外周血涂片 功能：PFA-100（PFA-200）、血小板聚集试验 其他：血小板膜糖蛋白受体、电镜等 PF