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胡椒总多酚的提取及其抗氧化活性研究-农学论文 胡椒总多酚的提取及其抗氧化活性研究 摘要：明确总多酚在胡椒果上的分布与抗氧化活性，建立胡椒总多酚的提取和分析方法，为胡椒总多酚的进一步研究奠定基础。以黑胡椒果实为主要原料，通过单因素和正交实验，分析乙醇浓度、提取时间、料液比、提取温度等4 个因素对胡椒总多酚提取率的影响。以没食子酸作为标准物质，利用福林酚比色法测定黑胡椒提取液中总多酚含量。分析测定胡椒果皮、种子和果梗中总多酚含量。以维生素C作对比，清除DPPH自由基的半抑制浓度(IC50)作为评价抗氧化活性指标，分析总多酚含量与IC50的相关性。结果表明：胡椒总多酚的最佳提取条件为55%乙醇浓度、提取时间4 h、料液比1:30 (g/mL)、提取温度90℃，黑胡椒总多酚含量为6.556 mg/g。总多酚类物质在胡椒果梗中含量最高，为12.208 mg/g，其次为果皮(12.105 mg/g)，种子最低(2.891 mg/g)。胡椒总多酚含量与IC50值呈显著负相关(P＜0.05)。胡椒总多酚相对维生素C具有更高的清除DPPH自由基能力。总多酚是胡椒的重要抗氧化活性成分，胡椒果梗和果皮可以作为一种良好的天然抗氧化剂物质来源。 关键词：胡椒；总多酚；提取；抗氧化活性；DPPH 中图分类号：TS201.2 文献标志码：A 论文编号：cja 0 引言 胡椒(Piper nigrum L.)，胡椒科(Piperaceae)胡椒属(Piper)多年生常绿藤本植物，原产于印度，是世界重要的热带香辛料作物，亦是人们喜爱的调味品，在医学工业和食品工业都有广泛用途。中国胡椒种植面积超过3 万hm2，年总产量超过3 万t，面积和产量分别居世界的第6位和第5位。海南省是中国胡椒的主产区，种植面积和产量均占全国的90%以上[1]。在国际贸易上以黑胡椒产品为主，而中国以白胡椒产品为主，因其耐贮藏，相对黑胡椒不易受微生物污染[2]，且在烹调过程中不影响色泽，因此深受海南人民的喜爱。但黑胡椒的抗氧化活性显著高于白胡椒产品[3]，这与胡椒果皮的存在和胡椒果实的加工工艺密切相关，胡椒果皮中存在多酚类物质[4]。近年来，国内外对植物中的多酚类物质的提取、测定及其抗氧化活性有大量的研究报道[5-10]，多以乙醇为提取溶剂，福林酚比色法测定总多酚含量[11-12]，以清除DPPH自由基的能力来评价抗氧化活性。但胡椒总多酚的研究相对较少，国外主要集中在体外抗氧化活性的研究[13-15]，国内，张水平等[3]研究报道了胡椒叶中总多酚含量及其抗氧化活性高于胡椒果，但没有用IC50来评价其抗氧化活性，吴桂苹等[16]研究报道了不同成熟度胡椒果实中总多酚含量，其提取和分析测定方法均参考国家标准GB/T 8313—2008《茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测方法》的方法提取和检测。杨继敏等[17]研究报道了热风干燥、冷冻干燥所得果梗中总多酚含量，但未对其抗氧化活性进行评价。由于研究作物不同，使用同一提取、分析方法必然会增大其物质含量的不确定度。目前，尚未见胡椒多酚类物质提取优化的研究报道。因此，在前人的研究基础上，采用不同浓度的乙醇作为提取溶剂，对海南黑胡椒果实中总多酚进行提取优化和含量测定，并对胡椒果皮、种子和果梗中的多酚类物质进行分析测定。研究了不同浓度提取物清除DPPH自由基的生物活性，通过IC50，并与维生素C 作为对比，评价其抗氧化活性。旨在确定胡椒总多酚类物质的最佳提取工艺条件，明确胡椒总多酚在胡椒果皮、种子以及果梗中的含量分布情况，为进一步研究胡椒总多酚的组成奠定基础，同时为合理开发利用胡椒初加工中的废弃物提供理论依据。 1 材料与方法 1.1 材料与设备 1.1.1 材料试验用印尼大叶种胡椒由海南省万宁市兴隆热带植物园提供，采收当天挑选果型完好、无病虫害和机械损伤的果穗，果实色泽一致，均为绿色，摊放在清洁的地面上日晒干燥至水分含量＜12%。同时用真空冷冻干燥机对胡椒鲜果进行冷冻干燥，干燥后用密封袋密封于-40℃冰箱保存，待测。 实验于2015 年8 月—2016 年5 月在中国热带农业科学院香料饮料研究所综合实验楼完成。 1.1.2 试剂无水乙醇（分析纯），碳酸钠（分析纯），没食子酸（色谱纯，纯度≥98%），福林酚试剂（Sigam 公司），维生素C（色谱纯，纯度≥98%），DPPH（Sigam公司）。1.1.3 设备QE-300 g 高速万能粉碎机（浙江屹立工贸有限公司）；MS3 basic 漩涡混合器（广州IKA科技有限公司）；Z36HK全能台式高速冷冻离心机（德国Hermle公司）；JDG-0.2 真空冷冻干燥机（兰州科近真空冻