ch04-6维生素的测定-VC的测定.ppt

2,4-二硝基苯肼比色法 测定步骤 4. 85%硫酸处理 当试管放入冰水后，向每一试管中加入5mL 85%硫酸，滴加时间至少需要1 min，需边加边摇动试管。将试管自冰水中取出，在室温放置30min后比色。 5.比色 用1cm比色杯，以空白液调零点，于500 nm波长测吸光值。 2,4-二硝基苯肼比色法 测定步骤 6.标准曲线绘制 ①加2 g活性炭于50 mL标准溶液中，摇动1 min，过滤。 ②取10 mL滤液放入500 mL容量瓶中，加5.0 g硫脲，用1%草酸溶液稀释至刻度，抗坏血酸浓度20μg/mL。 ③取②中5mL、10mL、20mL、25mL、40mL、50mL、60mL稀释液，分别放入7个100 mL容量瓶中，用1%硫脲溶液稀释至刻度，使最后稀释液中抗坏血酸的浓度分别为1、2、4、5，8、10、12μg/mL。 ④按样品测定步骤形成脎并比色。 ⑤以吸光值为纵坐标，以抗坏血酸浓度(μg/mL)为横坐标绘制标准曲线。 2,4-二硝基苯肼比色法 结果计算 式中：X——样品中总抗坏血酸含量，mg/100g； c——由标准曲线查得或由回归议程算得“样品氧化液”中总抗坏血酸的浓度，μg/mL； V——试样用1%草酸溶液定容的体积，mL； F——样品氧化处理过程中的稀释倍