常见的蛋白质变性与沉淀.pptVIP

二、实验原理 （一） 蛋白质沉淀原理 蛋白质溶于水形成稳定的胶体溶液，维持蛋白质胶体溶液稳定因素： 1.蛋白质颗粒表面的水化膜； 2.蛋白质颗粒表面的电荷。 去除上述稳定因素可使蛋白质沉淀析出。 蛋白质沉淀析出常用的方法有等电点法、盐析法、重金属离子沉淀法、有机酸试剂沉淀法、有机溶剂沉淀法等。 pH pI 实验现象分析 试管1中加入碱，其pH pI，蛋白质分子带负电荷，与Zn2+结合生成不溶于水的盐沉淀。 试管2中加入酸，其pH pI，蛋白质分子带正电荷，与三氯醋酸根结合生成不溶于水的盐沉淀。 试管3中只加有蛋白液和ZnSO4 蛋白质分子因带较少的正、负电荷，与Zn2+不反应。 实验现象分析 试管1中加入无水乙醇，破坏蛋白质分子表面的水化膜，使蛋白质沉淀。 试管2中加入无水乙醇和少量的氯化钠，不但破坏蛋白质分子表面的水化膜，同时蛋白质分子表面的电荷减少，沉淀更充分。 * * 实验项目 蛋白质变性与沉淀 一、实验目的 1.掌握蛋白质变性与沉淀的原理及各种沉淀方法； 2.熟悉刻度吸量管的正确使用；  3.了解蛋白质变性与沉淀两者的关系。 （二）蛋白质变性原理 蛋白质受某些物理或化学因素的影响，空间结构发生改变，生物活性丧失。称为蛋白