常见的高内涵筛选技术.pptVIP

药物高内涵筛选（high content screening, HCS）技术 汇报人：袁长胜 汇报提纲 HCS的概念 HCS概述 HCS的优势 HCS的组成和工作流程 HCS的应用 药物 HSC分析用于中药现代化的优势 HCS的概念 高内涵筛选(high content screening, HCS）是一种以细胞为检测对象，通过显微成像法记录多孔板内细胞的图像并通过分析图像中的信息来解析细胞内物质活动的技术 HCS概述 HSC是在高通量筛选(?High Throughput Screening，HTS）技术兴起后逐步发展而来，主要依赖于高分辨率的细胞成像统，充分整合样品制备技术、自动化设备、数据管理系统、检测试剂、生物信息学等资源的优势，在细胞或分子水平上实现对候选药物的多元化、快速化和规模化筛选 HSC 技术可在保持细胞结构和功能完整的条件下，同时检测被筛选样品对细胞生长、分化、迁移、凋亡、代谢途径及信号转导等多个环节的影响，涉及膜受体、胞内成分、细胞器和离子通道等众多靶点，从而得到多方面的筛选结果 HSC技术可从单一实验中获得大量与候选药物药理学活性及潜在的毒性作用等相关信息 HCS的优势 筛选结果多样化 多指标多靶点共同作用 检测体积不因检测指标增加而增高 操作步骤简单可行、自动化 获取信息是以细胞为单位，不是以微板孔为单位 HCS的组成和工作流程 HCS系统主要组成部分是：荧光显微系统、自动化荧光图像获取系统、检测仪器、图像处理分析软件、结果分析和数据管理系统和其它 高内涵筛选的技术基础：显微成像系统、分析软件、染色技术 HCS的应用 1、HSC 用于细胞周期检测 通过使用细胞核、非磷酸化和磷酸化 Rb这3种 标记物对细胞进行分析，从而得到细胞周期变 化的相关信息 2、用于细胞毒性检测 基于 HSC 开发出的多指标细胞毒性（Multi- parameter Cytotoxity）试剂盒，可以同时检测分析细胞核的 形态或大小、溶酶体物质变化以及细胞膜的通透性等多个指 标，从而综合反映和评估药物对细胞产生的毒性作用 HCS的应用 3、HSC 用于细胞凋亡检测 通过荧光探针和显微共聚焦成像技术可以选择性显示 凋亡细胞的形态差异，从而确定凋亡细胞不同阶段的特点 4、HSC 用于细胞信号转导的作用机制研究 （1）通过用磷酸化抗体的方法来直接检测分析信号分子的活性水平 （2）通过检测分子迁移等动态变化来观察其位置改变 因而HSC对于药物分子作用机制的研究有着良好的作用 HCS的应用 5、HSC用于蛋白偶联受体的作用机制研究 HSC针对G 蛋白偶联受体专门开发了一些通 用的试剂 药物 HSC分析用于中药现代化的优势 一、HSC为从整体上研究中医药提供了一种新的技术 手段，可以更好的满足中医药研究的以上复杂因素； 二、HSC 能够从活细胞水平深入研究细胞整体的生命功能，使结果更具有综合性和客观性 三、HSC能够针对中药多组分或多成分的这一特点进行高通量筛选，找到活性组分或成分 四、HSC 能够从细胞水平的多层次、多靶点深入探讨中药的作用机制，有利于阐明中药作用的具体环节 * * HCS工作流程