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一植物病真菌的分离培养
实验一 植物病真菌的分离培养 作 者：杨明秀 副教授 单 位：东北农业大学农学院 一、目的要求 学习植物病原真菌的一般分离培养方法。 二、材料 玉米大斑病叶片。 三、实验内容 （一）准备工作：分离工作应在清洁的环境下进行，最好在无菌操作箱内进行，没有无菌操作室和无菌操作箱可以在普通洁净的实验室内进行。 （二）分离材料选择 取材料后选择新鲜、症状典型的病组织，一般分离时采用病健组织交界部分作为分离材料。 （三）组织表面消毒 最常用的表面消毒剂有0.1%升汞溶液和70%酒精溶液。组织表面消毒时间，因不同材料而不同，一般用1-3分钟。 升汞溶液图片 （四）分离方法 1.取熔化的马铃薯培养基，温度降至40℃时滴入抑菌剂，摇匀后将管口经酒精灯火焰上灭菌后将培养基注入灭菌皿内，轻轻转动培养皿，使培养基迅速平铺皿底，制成平板。 2.取新鲜病叶病组织4-5小块（约0.2-0.3cm2），置70%酒精内1秒钟降低表面张力，然后置0.1%升汞里消毒1-2分钟。 3.用灭菌镊子将消毒组织移入灭菌皿中，用灭菌水换洗三次。 4.然后用灭菌镊子小心将小块病组织小心、迅速移入培养基平板上，每皿4-5块，均匀放置。 5.将培养皿置于25℃温箱培养，一周后观查结果。 结果图片 五、作业 每组进行病原菌分离，记录实验结果，写出实验报告，分析分离成功与失败的原因。 玉米大斑病症状 Exserohilum turcicum 形态图 * *
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