常见的艾滋病实验室检测规范要求.pptVIP

孕产妇产检时HIV初筛和复检流程 孕产妇临产及分娩首次HIV检测 流程 临产及分娩的孕产妇首次检测，应同时应用两种不同的快速检测试剂 进行筛查，若两种试剂均无反应直接报告阴性，若两种均有反应或其 中一种有反应必须立即报告临床采取相应措施。 ① 适用于未进行婴儿早期诊断检测或婴儿早期诊断检测结果为阴性的儿童。应于12、18月龄进行艾滋病抗体筛查 及必要的补充试验，以明确艾滋病感 染状态。 ② HIV感染产妇所生婴幼儿满12个月时应 进行第一次HIV抗体检测。 同时使用两 种不同原理或不同厂家筛查试剂进行 样本问题 抗体筛查和确认，目前常用的是血清或血浆 不复合要求样本： 严重脂血 严重溶血 样本量严重不足 …… 要有规范的送检单 检测试剂的选择 希望是敏感度和特异度均为100%， (任何检测都不可能绝对，所有方法都存在缺陷和不足) 检测结果是给临床医生提供诊断参考，而不是把实验结果作为唯一标准。 临床医生不应该过度依赖检测结果，而应该结合临床进行综合分析。 检测要点 根据目的选择检测方法及策略 严格遵守实验室标准操作程序（SOP） 结果判定以试剂说明书为标准 筛查试验有反应，须作补充试验 筛查试验无反应，不应作补充试验 对筛查及补充试验对象均应做咨询工作（接诊医生尤其作好工作） 结果解释 初筛实验中的假阳性： 血液恶性病变 自身免疫性疾病 多发性胆汁型肝硬化 酒精性肝炎 疫苗接种（流感，乙肝） 多发性骨髓瘤 肾移植或慢性肾衰竭 疟疾或丝虫病 其他（试剂或操作原因、某些孕妇） 结果解释 初筛实验中的假阴性 窗口期* 抗体迟反应* 免疫移植 换血输血 恶性肿瘤 免疫功能丧失（B细胞功能缺损） 其他（试剂或操作原因） 结果解释 确证试验的假阳性 样本搞错 实验过程中意外 。。。。 结果解释 确证试验的假阴性 感染晚期，无法产生能检测限内的抗体样本错误 。。。。 实际上确证样都是筛查阳性才确认，所以筛查的结果非常重要，记录也要能够准确无误。 低病毒检测值可能是核酸污染所致的结果，阴性不能排除感染！ 核酸用于HIV-1感染的诊断*： 检测值5000 CPs/mL(或IUs/mL)，报告检测值；检测值≤ 5000 CPs/mL(或IUs/mL)*，尽快再次严格按核酸检测的要求采样检测，报告检测值，结果5000 CPs/mL(或IUs/mL)，报告检测值，结果仍≤5000 CPs/mL，则需充分结合流行病学史、临床病史、CD4+T淋巴细胞计数和HIV-1抗体随访检测结果等进行综合判断。 结果解释 是否把核酸检测作为剖腹产依据？？ 上送阳性样本问题 1、送样单位、日期有没有逻辑错误 2、身份信息，户籍地址 3、检测试剂信息 4、检测结果信息（初筛、复检） 5、结论（按“规范”结果报告要求正确写） 6、一定要避免把样本送错的情形发生！ * * 实验方法 检测策略 结果解释 样本问题 人类免疫缺陷病毒(HumanImmunodeficiency Virus, HIV)， 属于逆转录病毒，RNA病毒，主要 破坏人体的免疫系统，主要分为HIV-1和HIV-2两种型 别。 HIV的主要基因及其产物 （HIV标志物） HIV病毒标志物产生的动力学 病毒RNA P24抗原 AB 感染时间 标志物强度 安全输血 流行病学调查、高危人群监测 自愿咨询检测VCT B C D 临床诊断 A 抗病毒治疗耐药性检测 免疫功能测定 F 抗病毒治疗后效果检测 E G 实验室检测主要目的 HIV HIV抗体检 测 HIV-1 P24抗原 检测 HIV核酸检测 CD4+/CD8+T淋 巴细胞检测 艾滋病适宜检测技术 筛查试验 ① 酶联免疫吸附试验 ELISA ② 快速检测 RT：金标、硒标等 ③ 化学发光免疫分析（CLIA） ④ 时间分辨荧光免疫（TRFIA） ⑤ 电化学发光免疫分析（ECLIA) 补充试验 ① 免疫印迹法 WB:（Western Blot） ② 条带免疫试验RIBA/LIA 核酸定性定量 实验原理：利用包被在固相载体表面的HIV抗原或抗体，与待检 血清及酶标记抗原结合形成抗原抗体复合物，加底物显色，用酶标仪（450/620nm双波长）测定光密度值。 ELISA 是国际上应用最早!! 目前HIV临床最常用的初筛检测方法!! E 固相抗原 标本（含抗 体） 酶标抗 原 底物 E E 实验原理：利用包被在固相载体表面的HI