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常见的各类干细胞应用特点研究比较
各类干细胞应用特点研究比较 徐瑞权 干细胞研究的重要性: 美国《Science》杂志 1999年——将“干细胞研究的新发现”列入十大科技进展之首 2000年——再次入选年度十大科技进展 2002年——列入值得关注的六大科技领域之一 至今——干细胞各领域的研究飞速发展 我国有关干细胞的研究也十分活跃,已有多个有关干细胞的“973”项目,召开过多次全国性或国际性学术会议,出版过多本专(译)著。“863”计划近期将为干细胞研究提供2亿元人民币的经费。 干细胞治疗的特点 1.一次性介入,永久性治疗; 2.不需要完全了解疾病发生的确切机理; 3.可应用于自身干细胞移植,避免产生免疫排斥反应。 干细胞应用的基础——调控 干细胞的调控是指给出适当的因子条件,对干细胞的增值和分化进行调控,使之向指定的方向发展。包括: 内源性调控 外源性调控 内源性调控 干细胞自身有许多调控因子可对外界信号起反应从而调节其增殖和分化: (1)细胞内蛋白对干细胞分裂的调控: 在果蝇卵巢中,调控干细胞不对称分裂的是一种称为收缩体的细胞器,包含有许多调节蛋白,如膜收缩蛋白和细胞周期素A。收缩体与纺锤体的结合决定了干细胞分裂的部位,从而把维持干细胞性状所必需的成分保留在子代干细胞中。 (2)转录因子的调控 在胚胎干细胞的发生中,转录因子Oct4是必需的。Oct4是一种哺乳动物早期胚胎细胞表达的转录因子,它诱导表达的靶基因产物是FGF-4等生长因子,能够通过生长因子的旁分泌作用调节干细胞以及周围滋养层的进一步分化。Oct4缺失突变的胚胎只能发育到囊胚期,其内部细胞不能发育成内层细胞团 白血病抑制因子(LIF) Tcf/Lef转录因子 外源性调控 干细胞的分化还可受到其周围组织及细胞外基质等外源性因素的影响 (1)分泌因子 间质细胞能够分泌许多因子,维持干细胞的增殖,分化和存活.有两类因子在不同组织甚至不同种属中都发挥重要作用,它们是TGFβ家族和Wnt信号通路。 干细胞的分化还可受到其周围组织及细胞外基质等外源性因素的影响 (1)膜蛋白介导的细胞间的相互作用 有些信号是通过细胞-细胞的直接接触起作用的。β-Catenin就是一种介导细胞粘附连接的结构成分。穿膜蛋白Notch及其配体Delta或Jagged也对干细胞分化有重要影响. 干细胞的分化还可受到其周围组织及细胞外基质等外源性因素的影响 (3)整合素(Integrin)与细胞外基质 整合素家族是介导干细胞与细胞外基质粘附的最主要的分子。整合素与其配体的相互作用为干细胞的非分化增殖提供了适当的微环境。 β1整合素 干细胞的分类及特点: 胚胎干细胞 成体干细胞 诱导分化干细胞(iPS) ,可诱导分化为机体 胚胎干细胞 胚胎干细胞的性质 衍生自囊胚的内细胞团或原始外胚层的细胞; 永生化(immortal); 能维持稳定的正常的二倍体染色体结构; 有稳定的发育潜能,能被诱导增殖或分化; 能参与胎儿所有组织的发育过程; 胚胎干细胞系的建立过程 ES细胞研究的趋势 改善ES细胞的体外培养条件,建立更有效更简便的获得ES细胞的方法。 定向诱导分化成特定类型细胞,用于临床疾病的治疗,并解决免疫排斥和潜在的致肿瘤的问题。 成体干细胞的横向分化的能力以及与胚胎干细胞的比较,成体干细胞能否替代胚胎干细胞? 胚胎干细胞的特点 增殖速度:18-24h分裂增殖一次 hES必须在含有白血病抑止因子(LIF)的培养基及成纤维细胞饲养层(freeder cell)条件下才能保持繁殖而不分化。 hES体外培养要解决的关键问题是维持细胞的分裂增殖而抑止其分化。 具有分化形成外、中、内三个胚层的潜能。 能形成嵌合体动物,从而成为联系细胞和个体之间的桥梁。 鉴定: 人胚胎干细胞特异表面抗原的表达 胚胎阶段特异性抗原: SSEA-1 SSEA-3 SSEA-4 Thmoson分离的hES 阴性 弱阳性 强阳性 Gearhart分离的hES 阳性 弱阳性 阳性 小鼠ES 阴性 阴性 阳性 鼠和人胚胎干细胞表达的表面抗原有种属差异。 Gearhart等认为SSEA-1阳性可能是源于原始生殖细胞的多能干细胞分化的标志. 细胞膜表面有特殊的标记:SSEA-3, SSEA-4, TRA-1-60, TRA-1-81 a 胚胎干细胞具有正常稳定的二倍体核型和带型。 b 胚胎干细胞具有较高的端粒酶活性及碱性磷酸酶的表达。 人胚胎干细胞系端粒酶活性都很高,说明其可在体外未分化状态进行长期培养。
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