《第7章核酸化学》-精选·课件.ppt

第7章 核酸化学 教学目的: 1. 掌握核酸和核苷酸的基本知识。 2. 熟悉核酸的两性解离性质。 3. 熟悉DNA的变性、复性和分子杂交意义。 4. 了解DNA芯片的概念及应用。 教学重点： 核酸的两性离解及变性、复性与分子杂交。 核酸分为脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。DNA主要集中在细胞核内, 线粒体、叶绿体、质体中也含有 DNA。RNA主要分布在细胞质中，核内含有部分RNA的前体。RNA主要分为: rRNA(80%)，tRNA(15%)，mRNA(5%)。 DNA是主要的遗传物质，在生物体内具有自体和异体催化功能，即自我复制和指导蛋白质的生物合成。 一 核酸的结构 2 重要的核苷酸衍生物 二 RNA的结构 1)原核mRNA的结构 原核mRNA一般为多顺反子，一条mRNA链含有指导合成几种蛋白质分子的信息，能作为翻译出几种蛋白质的模板。在原核mRNA分子的两端均无特殊的结构，在分子内部，一个顺反子的编码区是从起始密码AUG开始，到终止密码UAG为止。各个顺反子的编码区段之间均含有一段非编码区。在每个顺反子编码区AUG前有段多嘌呤区，称为SD序列，在蛋白质合成时与核糖体结合，起到在核糖体上定位的作用。 2)真核mRNA的结构 真核mRNA为单顺反子，结构模式为5-帽子-5非编码区-编码区-3非编码区-多聚A(polyA)。帽子的结构简式为m7GpppNmpNmpNp-。在帽子结构中，m7G与mRNA链形成5, 5-磷酸二酯键的反式连接，使mRNA的5末端没有游离的磷酸基, 而只有2-OH和3-OH, 这种RNA的5端能对核酸外切酶的降解表现出抗性。 帽子结构还可能具有协助核糖体与mRNA结合，促使核糖体在起始密码AUG处正确起始翻译的作用。 大多数真核mRNA的3末端具有多聚腺苷酸结构，称PolyA尾。PolyA的长度为20 ~ 200个腺苷酸。其作用是延长mRNA的寿命，有助于mRNA穿过核膜，进入细胞质执行其模板功能。 2 RNA的二级结构 1)tRNA的二级结构 tRNA的三叶草结构由以下几部分组成： ①反密码环 环上含有三联体反密码子。由7~9个核苷酸组成，在蛋白质合成时，其反密码子是tRNA识别mRNA上密码子的功能部位。 ②二氢尿嘧啶环 环上含有稀有碱基二氢尿嘧啶，又称 D 环，由8 ~12个核苷酸组成。 ③TyC环 环上含有稀有碱基T和y(假尿嘧啶)，由7个核苷酸组成。 ④氨基酸臂 由7对碱基组成, 其3末端为CCAOH，为氨基酸结合部位。 ⑤额外环 由3~18个核苷酸组成。不同的tRNA具有不同的碱基数，故又称为额外环。 三 DNA的结构 核酸的一级结构是指核酸分子中核苷酸的排列顺序(碱基顺序)，以及核苷酸之间的连接方式。DNA分子的多核苷酸链是以数量不等的四种脱氧核苷酸通过3-5磷酸二酯键连接起来的。DNA主链骨架是磷酸和脱氧核糖相间排列成的长链，碱基挂在戊糖的另一侧。DNA分子有两个游离末端：脱氧核糖5-OH末端(称5-末端)和脱氧核糖3-OH末端(称3-末端)。一级结构的书写方向为5末端→3末端。 不同的DNA分子具有不同的一级结构，即脱氧核苷酸数目不同，四种碱基的比例不同，排列顺序也不同。DNA分子中的核苷酸排列顺序是生物遗传信息的贮藏和表现形式，决定生物遗传性状的多样性和复杂性。 2 DNA的二级结构 ③螺旋横截面的直径约为2 nm，每条链相邻两个碱基平面之间的距离为0.34 nm，每10个核苷酸形成一个螺旋，其螺距高度为3.4 nm。 ④两条DNA链相互结合以及形成双螺旋的力是链间的碱基对所形成的氢键。碱基的相互结合具有严格的配对规律，即腺嘌呤(A)与胸腺嘧啶(T)结合，鸟嘌呤(G)与胞嘧啶(C)结合，这种配对关系，称为碱基互补。A和T之间形成两个氢键(A=T)，G与C之间形成三个氢键(C≡G)。 ⑤在DNA分子中，嘌呤碱基的总数与嘧啶碱基的总数相等(A+G=C+T)。 3 DNA的三级结构 4 染色体结构 真核细胞核内的染色体是由DNA和组蛋白结合而成的复合物，一条染色体只含一个DNA分子。染色体DNA必须经过复杂的盘曲折叠才能包装到细胞内。染色体中的蛋白质分为组蛋白和非组蛋白两大类，组蛋白有5种，含有较多的碱性氨基酸，在生理pH条件下带正电荷，与DNA结合紧密。非组蛋白种类很多，多数为酸性蛋白，与DNA结合较松散。组蛋白、非组蛋白、染色体DNA组装成染色体。 四 核酸的理化性质 2 核酸的两性解离