电击缓冲液对哺乳动物细胞电穿孔效率的影响.pdfVIP

军事医学科学院院刊　1999年6月 第23卷 第2期 Bu ll A cad M il M ed Sci, J un 1999; 　V o l 23　N o 2 10 1 电击缓冲液对哺乳动物细胞电穿孔效率的影响 钱　锋　 肖成组 军事医学科学院生物工程研究所　北京　10007 1 【摘要】　 目的: 提高哺乳动物细胞转染率, 使非贴壁细胞和难转染细胞得到转染。方法: 比较了在8 种不同电击缓冲液条件下3 种细胞的电穿孔效率。电击缓冲液包括细胞培养基如R PM I 1640、 、 12、磷酸缓冲液 、 、 、 及 , 3种细胞分别是贴壁生长的 DM EM DM EM F K PB S HB S H eB s PB S cy tom ix 细胞、半贴壁生长的 20细胞及悬浮生长的 细胞。通过 染色确定细胞转染 V ero Sp N am a lw a X Ga l 率, 通过锥虫蓝染色确定细胞存活率。结果: 所有细胞特别是那些难以在其他缓冲液中获得转染的 细胞如 Sp 20和N am a lw a 细胞在 cy tom ix 电击缓冲液中都获得了较高转染率; cy tom ix 缓冲液更 利于电击后细胞的存活。结论: cy tom ix 电击缓冲液为转染非贴壁细胞和难转染细胞提供了一种较 好的解决办法。 关键词　电穿孔; 缓冲剂; 细胞, 培养的 中国图书资料分类法分类号　 233 Q Ef f ect of electropora t ion buf f er s on gen e tran sf er ef f ic ien cy of m amm a l ian cells Q ian F eng ,X iao Ch eng z u In st itu te o f B io techno logy, A cadem y o f M ilitary M ed ica l Scien ce s, B eij ing 10007 1 A bstract　O bj ect ive: To im p rove t ran sfect ion eff icien cy o f m amm a lian cells an d to su cce ssfu lly . : t ran sfect non adh eren t cell lin e s M ethods T h e eff icien cy o f gen e t ran sfer in to th ree m amm a lian ( ) , cell lin e s in clu d in g adh eren t A fr ican g reen m onk ey k idn ey cells V ero sem i adh eren t m u r in e 20 14 8 hyb r idom a Sp A G cells an d su sp en sded hum an B lym p hob la